[发明专利]一种AGTR1基因rs5186位点多态性检测用引物组及其应用

说明书

本发明属于基因检测技术领域，具体涉及一种AGTR1基因rs5186位点多态性检测用引物组及其应用。所述引物组含有野生型上游引物SEQ ID NO.1，突变型上游引物SEQ ID NO.6，及下游引物SEQ ID NO.11。采用该引物组进行AGTR1基因rs5186位点多态性检测，成本低，操作方便，检测周期短，检测效率高，且全程闭管操作，无需后处理或电泳检测，克服了常规PCR技术的易污染、出现假阳性的问题，能有效降低污染风险，保证检测的准确性。

技术领域

本发明属于基因检测技术领域，具体涉及一种AGTR1基因rs5186位点多态性检测用引物组及其应用。

背景技术

高血压是我国最常见的慢性疾病之一，主要受遗传因素和环境因素的共同影响。研究表明，血管紧张素II受体拮抗剂(Angiotensin II receptor antagonists)是一类作用于肾素-血管紧张素系统(rennin-angiotensin system，RAS)的药物，主要应用于治疗高血压、糖尿病肾病和充血性心力衰竭。I型血管紧张素II受体(Angiotensin II receptortype 1，AGTR1)是血管紧张素II(angiotensin，Ang II)的受体，血管紧张素Ⅱ主要通过其I型受体的介导从而发挥其作用。AGTR1基因位于人染色体3q21-25，仅含1个外显子，无内含子区域。研究表明，AGTR1基因是高血压发病的最重要的候选易感基因。

目前用于检测基因多态性的方法主要包括DNA测序技术、高分辨率溶解曲线法、基因芯片技术和Taqman-qPCR法。DNA测序法的操作复杂，成本较高且检测时间长。基因芯片技术的检测成本高，特异性差，假阳性率高且耗时较长；高分辨率溶解曲线法对仪器和操作人员要求较高，不适合临床推广。Taqman-qPCR法虽然检测灵敏度高，但检测特异性不高。

因此如何在AGTR1基因检测保持高灵敏度的同时，提高其检测特异性，降低假阳性率，操作简便，适于临床推广应用，仍是本领域亟待解决的技术问题。

发明内容

针对现有技术中存在的检测AGTR1基因时检测灵敏度低、假阳性率高、检测周期长、操作复杂、成本高等问题，本发明提供一种AGTR1基因rs5186位点多态性检测用引物组，及利用该引物组简便地检测AGTR1基因的方法。其具有灵敏度高、特异性强、操作简便、检测周期短、低成本等特点，可快速精准的对AGTR1基因的多态性进行检测，从而指导高血压个体化用药。

本发明技术方案为，一种AGTR1基因rs5186位点多态性检测用引物组，含有野生型上游引物SEQ ID NO.1，突变型上游引物SEQ ID NO.6，及下游引物SEQ ID NO.11。

野生型上游引物SEQ ID NO.1：5’-AGCACTTCACTACCAAATGAGCA-3’；

突变型上游引物SEQ ID NO.6：5’-AGCACTTCACTACCAAATGAGCC-3’；

下游引物SEQ ID NO.11：5’-AGCCGTCATCTGTCTAATGCA-3’。

本发明还提供一种AGTR1基因rs5186位点多态性检测用试剂盒，含有本发明AGTR1基因rs5186位点多态性检测用引物组，所述引物组含有野生型上游引物SEQ ID NO.1，突变型上游引物SEQ ID NO.6，及下游引物SEQ ID NO.11。

本发明试剂盒还包括AGTR1基因rs5186位点野生型质粒阳性对照，AGTR1基因rs5186位点突变型质粒阳性对照，及无核酸酶ddH2O阴性对照。

本发明还提供一种AGTR1基因rs5186位点多态性检测方法，包含步骤：

(1)提取样本DNA；