[发明专利]葡萄糖转运蛋白及其在提高有机酸生产中的应用

权利要求书

1.如SEQ ID NO：1至SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12中任一项的氨基酸序列所示的葡萄糖转运蛋白在提高菌株生产柠檬酸中的应用，其中所述菌株选自黑曲霉（Aspergilus niger），构巢曲霉（Aspergillus nidulans），米曲霉（Aspergillus oryzae），产黄青霉（Penicillium chrysogenum），里氏木霉（Trichoderma reesei），玉蜀黍黑粉菌（Ustilago maydis），嗜热毁丝霉（Myceliophthora thermophila）。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述菌株选自黑曲霉（Aspergilus niger），构巢曲霉（Aspergillus nidulans）。

3. 一种柠檬酸生产工程菌株的构建方法，所述方法包括增强菌株中葡萄糖转运蛋白的活性，所述葡萄糖转运蛋白是如序列SEQ ID NO：1至SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：8、SEQ IDNO：11、SEQ ID NO：12中任一项的氨基酸序列所示的葡萄糖转运蛋白；

所述菌株选自黑曲霉（Aspergilus niger），构巢曲霉（Aspergillus nidulans），米曲霉（Aspergillus oryzae），产黄青霉（Penicillium chrysogenum），里氏木霉（Trichoderma reesei），玉蜀黍黑粉菌（Ustilago maydis），嗜热毁丝霉（Myceliophthora thermophila）。

4. 如权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述菌株选自黑曲霉（Aspergilus niger），构巢曲霉（Aspergillus nidulans）。

5. 如权利要求3所述的构建方法，其特征在于，进一步增强所述菌株中柠檬酸转运蛋白CexA的活性，所述CexA的序列如SEQ ID NO：13所示。

6.如权利要求5所述的构建方法，其特征在于，所述增强柠檬酸转运蛋白CexA的活性是通过向所述菌株导入含有CexA蛋白的表达载体，或增加宿主菌株中的拷贝数，或通过对其调控序列进行修饰，以实现过表达。

7.如权利要求3至6任一项所述的构建方法，其特征在于，所述增强菌株中葡萄糖转运蛋白的活性是通过向所述菌株导入含有所述葡萄糖转运蛋白的表达载体，或增加宿主菌株中的拷贝数，或通过对其调控序列进行修饰，以实现葡萄糖转运蛋白的过表达。

8.一种柠檬酸生产菌株，其是由权利要求3-7任一项所述构建方法构建获得的。

9.一种生产柠檬酸的方法，其特征在于，培养按照权利要求3-7任一项所述构建方法构建的菌株使之生产柠檬酸，并分离柠檬酸。