[发明专利]一种混菌发酵生产支链氨基酸的方法

权利要求书

1.一种混菌发酵生产支链氨基酸的方法，其特征在于，选择异亮氨酸生产菌、亮氨酸生产菌或缬氨酸生产菌中的2株不同的生产菌株，分别为谷氨酸棒杆菌株SML001，保藏编号为CGMCC NO.13408和谷氨酸棒杆菌株SMV001，保藏编号为CGMCC NO.11938；采用混菌联合发酵方法，制备得到亮氨酸、缬氨酸、异亮氨酸的质量比为2：0.8-1.2：0.8-1.2的发酵液；

所述混菌联合发酵方法具体包括如下步骤：

(1)分别将所述谷氨酸棒杆菌株SML001和所述谷氨酸棒杆菌株SMV001用发酵罐进行培养，依次得到种子液1和种子液2；

(2)按照5-12％的接种比将种子液1接入发酵罐中，再按照12-20％的接种比将种子液2接入所述发酵罐中，进行联合培养发酵，制备得到发酵液；联合培养发酵过程中，发酵的前0-30h温度控制在28-31℃；发酵的后30-50h温度控制在31-34℃。

2.根据权利要求1所述的一种混菌发酵生产支链氨基酸的方法，其特征在于，所述步骤(2)联合培养发酵过程中，发酵条件为：罐压为0.04-0.1Mpa，通气量为5-25L/min，搅拌速度为200-800rpm，pH为6.6-7.2；通过依次循环调节罐压、通气量、搅拌速度，将溶氧维持在15-35％。

3.根据权利要求1或2所述的一种混菌发酵生产支链氨基酸的方法，其特征在于，所述谷氨酸棒杆菌株SML001种子所用培养基组成包括：葡萄糖30g/L、酵母粉10g/L、硫酸铵5g/L、磷酸氢二钾1g/L、硫酸镁0.6g/L、消泡剂0.3mL/L、生物素0.2mg/L、VB1 2mg/L。

4.根据权利要求1或2所述的一种混菌发酵生产支链氨基酸的方法，其特征在于，所述谷氨酸棒杆菌株SMV001种子所用培养基组成包括：葡萄糖20g/L、玉米浆40g/L、硫酸铵10g/L、氯化钾0.5g/L、硫酸镁0.6g/L、消泡剂0.3mL/L、生物素0.4mg/L、VB1 2mg/L。

5.根据权利要求1或2所述的一种混菌发酵生产支链氨基酸的方法，其特征在于，所述步骤(2)联合培养发酵过程中，发酵所用培养基组成包括：葡萄糖40g/L、玉米浆45g/L、硫酸铵15g/L、甜菜碱1.5g/L、氯化胆碱0.5g/L、磷酸氢二钾1g/L、硫酸镁2g/L、消泡剂0.3mL/L、生物素0.1mg/L、VB1 0.1mg/L。