[发明专利]一种以MYST2基因作为大白猪瘦肉率和平均日增重的遗传标记及其检测方法和应用

权利要求书

1.一种以MYST2基因作为大白猪瘦肉率和平均日增重的遗传标记，其特征在于：所述的以MYST2基因作为大白猪瘦肉率和平均日增重的遗传标记的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

2.根据权利要求1所述的以MYST2基因作为大白猪瘦肉率和平均日增重的遗传标记，其特征在于：所述的以MYST2基因作为大白猪瘦肉率和平均日增重的遗传标记的PCR扩增的特异引物包含第一引物，所述的第一引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

3.根据权利要求1所述的以MYST2基因作为大白猪瘦肉率和平均日增重的遗传标记，其特征在于：所述的以MYST2基因作为大白猪瘦肉率和平均日增重的遗传标记的PCR扩增的特异引物包含第二引物，所述的第二引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。

4.一种权利要求1所述的以MYST2基因作为大白猪瘦肉率和平均日增重的遗传标记的检测方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)从猪耳组织中提取基因组DNA，根据猪MYST2基因序列和所述的两条遗传标记特异引物，用该两条引物在猪基因组DNA中进行PCR扩增，得到PCR产物；

(2)将步骤(1)中得到的PCR产物用PstI限制性内切酶酶切，在2％的含有溴化乙锭的琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果，凝胶成像系统观察并记录基因型；根据条带差异，可分为三种基因型，具有282bp、164bp两条带的是AA型，只有446bp一条带的是BB型，同时具有446bp、282bp、164bp三条带的是AB型。

5.根据权利要求4所述的以MYST2基因作为大白猪瘦肉率和平均日增重的遗传标记的检测方法，其特征在于：在步骤(1)中，所述的PCR程序为：94℃4min，35个循环94℃ 50s，58℃ 45s，72℃ 50s，然后72℃ 10min，最后4℃终止反应，PCR反应体系为：2.0μL DNA(100ng)，2.5μL 2mM mixed dNTPs，2.5μL 10×Taq DNA polymerase buffer，2.5μL 25mMMgCl₂，1μL 20μM第一引物，1μL 20μM第二引物，2unit of Taq DNA polymerase(1U/μL)，11.5μL无菌水。

6.根据权利要求5所述的以MYST2基因作为大白猪瘦肉率和平均日增重的遗传标记的检测方法，其特征在于：在步骤(2)中，所述的PCR产物PstI酶切反应体系为：10μL PCR产物，7μL无菌水，1μL Pst I(10U),2μL10×buffer，PCR产物PstI酶切反应条件为：混合物在37℃恒温培养箱培养4h。

7.权利要求1至6任一项所述的以MYST2基因作为大白猪瘦肉率和平均日增重的遗传标记在长大的二元母猪产仔数性状标记辅助选择中的应用。