[发明专利]一种羟基酪醇对小鼠急性心肺损伤保护作用的方法

权利要求书

1.一种羟基酪醇对小鼠急性心肺损伤保护作用的方法，其特征在于：包括以下实验原料：小鼠若干(长沙市天勤生物技术有限公司)，LPS药剂(上海沪鼎生物科技有限公司)，HYD试剂(桂林益天成生物科技有限公司)，GA甘草酸(湖北信康医药化工有限公司)和生理盐水(上海一研生物科技有限公司)。

2.根据权利要求1所述的一种羟基酪醇对小鼠急性心肺损伤保护作用的方法，其特征在于：包括如下步骤：

S1、实验分组：小鼠在实验室环境中饲养一周后对小鼠进行分组，按照随机原则分成正常组、模型组、预防组、单一治疗组和双重治疗组；

S2、实验建模：模型组、预防组、单一治疗组和双重治疗组进行LPS药剂注射，用碘伏消毒小鼠腹部皮肤，用棉花擦除碘伏，按照5mg/KG小鼠体重的剂量对小鼠腹腔注射LPS药剂，LPS药剂浓度为0.5mg/mL，正常组按照与其他小组LPS剂量相同的剂量注射生理盐水，预防组在进行LPS给药前按照1-3mg/KG小鼠体重的剂量对小鼠投喂HYD试剂2天；

S3、小鼠处理：正常组小鼠在注射生理盐水后按照饲喂标准正常投喂，模型组小鼠在注射LPS后按照饲喂标准正常投喂，预防组小鼠在注射LPS后按照饲喂标准正常投喂，同时停止投喂HYD，单一治疗组在注射LPS10-20min后对小鼠进行灌胃给药一次，按照10-20mg/KG体重的剂量灌胃HYD，双重治疗组在注射LPS10-20min后对小鼠进行灌胃给药一次，按照10-20mg/KG体重的HYD剂量和30-50mg/KG体重的GA剂量对小鼠进行灌胃，同时对建模后的各组小鼠进行肺泡灌洗，灌洗液于-20℃保存；

S4、实验分析a：各组建模24h后对小鼠进行超声心动检测，观察并记录各组左心室功能的变化情况，获取左心室二维图像和M型超声心动图，测量计算后得出左心室的EF和FS；

S5、实验分析b：各组建模24h后对小鼠进行麻醉，取右肺中叶，测量肺系数，切片后同时用HE进行染色，观察小鼠肺组织病理学变化情况；

S6、实验分析c：各组小鼠灌洗液进行离心处理，去除灌洗液中的炎症细胞，离心10-16min后取上清液进行TNF-α、IL-6、IL-1β、cox-2和HMGB-1蛋白表达进行检测，同时对小鼠心脏组织提取RNA，采用Real-time PCR法检测各组表达差异；

S7、小鼠处理：实验完成后对小鼠进行分类冻存于-80℃并向，并统一进行无害焚化处理。

3.根据权利要求2所述的一种羟基酪醇对小鼠急性心肺损伤保护作用的方法，其特征在于：小鼠实验前进行筛选，选取成年雄性小鼠，取6-8周龄，体重为19-23g进行实验。

4.根据权利要求2所述的一种羟基酪醇对小鼠急性心肺损伤保护作用的方法，其特征在于：小鼠建模注射过程中在5min内完成，全程无菌作业，使用一次性耗材，避免因操作导致实验各组模型差异。