[发明专利]一种花生果腐病接种方法

说明书

本发明公开了一种花生果腐病接种方法，涉及花生果腐病研究技术领域。所述花生果腐病接种方法，包括以下步骤：S1：选取健康饱满花生种子，先用75％的酒精浸泡0.5～1min，然后用10％次氯酸钠浸泡15min，灭菌水洗3次后进行播种；S2：用培养基培养花生果腐病致病菌，待花生果腐病致病菌长出菌丝，将花生果腐病致病菌菌丝接种到泡涨灭菌后的谷粒上；S3：待谷粒上长满菌丝后，取质量比为1:1:2的菌谷粒、无菌沙土和无菌水的混合物，覆盖步骤S1中培育出的花生样本的根部进行花生果腐病致病菌接种。本发明，通过采用谷粒作为致病菌载体，同时配合质量比为1:1:2的菌谷粒、无菌沙土和无菌水的混合物，对花生样本根部进行覆盖接种，明显提高了花生果腐病接种后的发病率。

技术领域

本发明涉及花生果腐病研究技术领域，特别涉及一种花生果腐病接种方法的技术领域。

背景技术

花生果腐病，又称烂果病，是一种世界性的病害，主要为害花生的荚果，造成荚果腐烂。在我国山东、河北、吉林和河南等地均有花生果腐病发生，危害严重，尤其是重茬地块，有逐年加重趋势。一般发病田产量损失高达15％，在重病田块甚至会颗粒无收。

目前，花生果腐病没有抗病品种，所以对现有资源的抗性鉴定至关重要。花生果腐病的人工高效接种，是花生果腐病种质培育和抗病机制研究的重要基础，是实现花生果腐病高效防控的关键。

但是，现有技术中，花生果腐病的接种成功率低，严重影响花生果腐病的研究。如何解决上述技术问题，是目前花生果腐病研究技术领域需要解决的技术问题。

发明内容

本发明针对上述技术问题，提出一种花生果腐病接种方法。

本发明采用技术方案为：一种花生果腐病接种方法，包括以下步骤：

S1：选取健康饱满花生种子，先用75％的酒精浸泡0.5～1min，然后用10％次氯酸钠浸泡15min，灭菌水洗3次后进行播种；

S2：用培养基培养花生果腐病致病菌，待花生果腐病致病菌长出菌丝，将花生果腐病致病菌菌丝接种到泡涨灭菌后的谷粒上；

S3：待谷粒上长满菌丝后，取质量比为1:1:2的菌谷粒、无菌沙土和无菌水的混合物，覆盖步骤S1中培育出的花生样本的根部进行花生果腐病致病菌接种，并在其上覆一层无菌的沙土后进行培养，培养到到花生饱果成熟期即可。

在上述方案的基础上，所述谷粒为燕麦粒。

在上述方案的基础上，所述花生果腐病致病菌为群结腐霉菌。

在上述方案的基础上，所述花生种子在室内进行播种和培养，控制室内温度28℃-30℃、湿度85％；14h/10h光暗交替。

在上述方案的基础上，所述花生果腐病致病菌接种时间为花生长到下针期或结荚期或下针期与结荚期之间。

在上述方案的基础上，所述花生样本的根部接种花生果腐病致病菌后，适宜浇水，控制谷粒和砂土的混合物含水量大于30％，且小于60％。

需要说明的：

1、选用泡涨灭菌后的燕麦粒，其中，泡涨，是为了让燕麦粒吸水变软后容易被腐霉菌株寄生；灭菌，是为了接种时排除其他菌株的干扰。

2、对于菌燕麦粒、无菌沙土和无菌水的质量比，选择1:1:2，其主要原因是让燕麦粒和砂土保持湿润，水又不是特别多，水多了，燕麦粒容易烂掉，太干不利于菌在燕麦粒上的寄生。

3、将花生种子在室内进行播种和培养，可以控制花生生长的最适温湿度，提供合理光照。

本发明的有益效果是：