[发明专利]一种倍半萜合酶IlTPS1，编码核苷酸序列及其应用

权利要求书

1.一种倍半萜合酶IlTPS1，其特征在于，所述IlTPS1的氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。

2.编码权利要求1所述的倍半萜合酶IlTPS1的核苷酸序列。

3.如权利要求2所述的编码倍半萜合酶IlTPS1的核苷酸序列，其特征在于，所述核苷酸序列为如下序列之一：

i）SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列；或，

ii）SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列的互补序列或简并序列。

4.权利要求1所述的倍半萜合酶IlTPS1，或，权利要求2或3任一项所述的编码倍半萜合酶IlTPS1的核苷酸序列在合成倍半萜中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述倍半萜为presilphiperfolane-8β-ol。

6.载体，其特征在于，包含权利要求2或3任一项所述的核苷酸序列。

7.非繁殖材料的遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，其包含权利要求1所述的氨基酸序列，或包含权利要求2或3任一项所述的核苷酸序列，或导入了权利要求6所述的载体。

8.根据权利要求7所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为微生物细胞。

9.根据权利要求8所述的宿主细胞，其特征在于，所述微生物细胞包括链霉菌、假单孢菌、芽孢杆菌、酵母细胞、大肠杆菌中的至少一种。

10.一种生产倍半萜的酵母工程菌株，其特征在于，所述菌株包含甲羟戊酸途径相关基因和倍半萜合成的相关基因，所述倍半萜合成的相关基因包含权利要求2或3所述的核苷酸序列。

11.根据权利要求10所述的生产倍半萜的酵母工程菌株，其特征在于，所述甲羟戊酸途径的相关基因包括羟甲基戊二酰辅酶A还原酶基因HMGR，麦角甾醇通路调控基因upc2-1和法尼基焦磷酸合酶基因FPS。

12.根据权利要求10或11所述的生产倍半萜的酵母工程菌株，其特征在于，采用下述制备方法获得：将N末端截断的HMGR基因，upc2-1基因分别整合到酵母基因组中，替换启动子弱化分路代谢流，再将FPS基因整合到酵母基因组中，最后导入权利要求6所述的载体。

13.根据权利要求12所述的生产倍半萜的酵母工程菌株，其特征在于，所述菌株为含有pESC-Ura::IlTPS1质粒的酿酒酵母菌。

14.一种生产倍半萜的方法，其特征在于，包括在权利要求1所述的倍半萜合酶IlTPS1存在下将法尼基二磷酸转化成倍半萜化合物；或，

使用权利要求7-9所述的遗传工程化的宿主细胞，或权利要求10-13任一项所述的酵母工程菌生产倍半萜。

15.根据权利要求14所述的方法，其特征在于，所述倍半萜为presilphiperfolane-8β-ol。

16.生产倍半萜的宿主细胞在抑制真菌中的应用，其特征在于，所述宿主细胞包含权利要求1所述的IlTPS1氨基酸序列和/或权利要求2或3所述核苷酸序列，所述真菌为稻黑孢Nigrospora oryzae。