[发明专利]一种耐酸产乙偶姻的贝莱斯芽孢杆菌DQA21及应用

权利要求书

1.一种耐酸产乙偶姻的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)DQA21，其特征是，所述贝莱斯芽孢杆菌DQA21保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2020360，保藏日期为2020年7月27日。

2.根据权利要求1所述的一种耐酸产乙偶姻的贝莱斯芽孢杆菌DQA21，其特征是，所述贝莱斯芽孢杆DQA21的pH耐受性为pH 3.5-7，在pH 4.5-7生长良好，在pH 5时菌株生长繁殖最快。

3.根据权利要求1所述的一种耐酸产乙偶姻的贝莱斯芽孢杆菌DQA21，其特征是，所述贝莱斯芽孢杆菌DQA21的筛选包括以下步骤：

1)初筛：a、从大曲中筛选芽孢杆菌；b、采用肌酸显色法筛出能合成乙偶姻的芽孢杆菌，具体方法为：将1g 1-萘酚、0.1g肌酸、4g NaOH配制成100mL肌酸混合液，将筛选得到的芽孢杆菌菌株轻刮一环菌于盛有1mL混合液的试管内；

2)复筛：a、将步骤1)中初筛获得的芽孢杆菌菌株接种于含有50mL种子培养基的250mL三角瓶中，在37℃、180r/min条件下摇床培养12h；b、以5％的接种量接种至含有50mL发酵培养基的250mL三角瓶中，每株3个平行，准备一个空白对照，在37℃、180r/min条件下摇床培养72h后，结束发酵，离心取上清液，以比色法测定发酵液的OD值，获得乙偶姻产量为18.37g/L的菌株，将该菌株保藏于甘油管中；

步骤2)中种子培养基为：葡萄糖3％、蛋白胨1％、酵母粉0.5％、氯化钠0.05％，pH 6.0；

步骤2)中发酵培养基为：葡萄糖8％、蛋白胨1％、酵母粉1％、氯化钠0.05％、七水硫酸镁0.03％、二水氯化钙0.1％、磷酸二氢钾0.03％、硫酸铵0.03％，pH 6.0。

4.如权利要求1所述的一种耐酸产乙偶姻的贝莱斯芽孢杆菌DQA21在发酵生产乙偶姻中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征是，所述贝莱斯芽孢杆菌DQA21发酵生产乙偶姻的发酵条件为：葡萄糖浓度40-120g/L、pH 5.0-7.0、温度31-43℃、装液量30-70mL、接种量3-11％、转速120-240r/min。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征是，所述贝莱斯芽孢杆菌DQA21发酵生产乙偶姻的发酵条件为：葡萄糖浓度80g/L、pH 5.46、温度37.31℃、装液量49.17mL、接种量5％、转速210r/min。

7.如权利要求1所述的一种耐酸产乙偶姻的贝莱斯芽孢杆菌DQA21在大曲制作中的应用，其特征是，所述贝莱斯芽孢杆菌DQA21在固态发酵中还产生了2-甲基吡嗪，以及苯乙醇、甲酸乙酯、正己酸乙酯、苯乙酸乙酯风味物质。