[发明专利]一种球孢白僵菌内共生萝卜植株的方法及其共生植株对小菜蛾的防御

说明书

本发明涉及一种球孢白僵菌内共生萝卜植株的方法及其共生植株对小菜蛾的防御。该方法包括：将萝卜种子进行表面消毒，消毒完毕后用无菌吸水纸吸干种子表面的水分，然后将种子倒入事先配好的装有Beauveria bassiana孢子悬浮液的锥形瓶中浸种；所述球孢白僵菌菌株是从中国林业微生物保藏管理中心获得，分离于光肩星天牛幼虫，后保存于北纳菌种保存中心，菌种保藏号为BNCC117565；本发明提供的定殖方法简便有效，B.bassiana内共生萝卜后能抑制小菜蛾的取食和生长发育，提高幼虫死亡率，在生物防治小菜蛾方面存在积极的意义，同时推动球孢白僵菌作为内生真菌进行生物防治的进程。

技术领域

本发明涉及一种球孢白僵菌内共生萝卜植株的方法及其共生植株对小菜蛾的防御。

背景技术

内生真菌是寄生于健康植物中且不引起侵染的一类真菌。内生真菌往往对其共生的寄主植物存在有利影响，不仅可以促进寄主植物的生长发育，还可增强寄主植株对害虫的抗性，间接对害虫产生抑制作用。昆虫病原真菌作为直接毒害害虫的病原性天敌，是防治害虫的重要生物资源。近年来一直有研究记录昆虫病原真菌具有植物内生性，能够在自然环境中或采用人工接种方式直接与植物产生营养关系，其中白僵菌是目前描述较多的可以定殖在多种植物内的昆虫病原真菌。白僵菌通过喷施、浸种、灌根等人为的接种手段，使其成为内生真菌持续的定殖在植物当中，不仅能够促进植物生长，还能提高植物抗性。目前，国外关于利用白僵菌作为植物内生真菌提高植物抗虫性的研究较为深入，但国内相关研究较少，并且国内外还没有关于白僵菌作为萝卜内生真菌的研究。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种球孢白僵菌内共生萝卜植株的方法及其共生植株对小菜蛾的防御，利用球孢白僵菌孢子悬液浸种法处理萝卜种子，使其在萝卜中定殖，发现通过浸种法可以将B. bassiana有效地定殖到萝卜植株中。B. bassiana内共生萝卜后能抑制小菜蛾的取食和生长发育，在生物防治小菜蛾方面存在积极的意义，具有一定的应用前景，有利于综合评价球孢白僵菌作为萝卜内生真菌的多重价值，推动球孢白僵菌作为内生真菌进行生物防治的进程，从而产生更显著的经济、社会和生态效益。

为实现上述目的本发明采用以下技术方案实现：

一种球孢白僵菌内共生萝卜植株的方法，包括以下步骤：将萝卜种子进行表面消毒，消毒完毕后用无菌吸水纸吸干种子表面的水分，然后将种子倒入事先配好的装有球孢白僵菌孢子悬浮液的锥形瓶中浸种。

所述表面消毒的方法为：用75%乙醇溶液浸泡3 min，再使用1.5%次氯酸钠溶液浸泡3 min，最后用无菌水清洗3次，每次10 s。

所述球孢白僵菌孢子悬浮液的浓度为1×10⁸个／mL；所述悬浮液的溶剂为0.05%Tween-80溶液。

所述浸种的条件为:温度25℃，转速110转/min，浸种12 h。

所述萝卜品名为南畔洲大萝卜。

进一步地，将利用上述方法获得的萝卜植株应用于防御小菜蛾中。

本发明与现有技术相比具有以下有益效果：

为球孢白僵菌植物内生性研究提供了新的记录，发现通过浸种法可以将B. bassiana有效地定殖到萝卜植株中，且B. bassiana内共生萝卜后能抑制小菜蛾的取食和生长发育。

附图说明

图1：B. bassiana在萝卜叶、茎、根的定殖。

图2：B. bassiana在萝卜中的定殖对萝卜株高的影响。