[发明专利]与烟草PVY抗性紧密连锁的分子标记、引物及应用有效
| 申请号： | 202011147704.3 | 申请日： | 2020-10-23 |
| 公开（公告）号： | CN112094942B | 公开（公告）日： | 2023-09-12 |
| 发明（设计）人： | 林世锋;李尊强;元野;王仁刚;任学良;龙明锦;王自力;张吉顺;余婧;王志红 | 申请（专利权）人： | 贵州省烟草科学研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 贵阳中新专利商标事务所 52100 | 代理人： | 张行超 |
| 地址： | 550081 贵州*** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 烟草 pvy 抗性 紧密 连锁 分子 标记 引物 应用 | ||
1.一种与烟草PVY抗性紧密连锁的分子标记，其特征在于：与野生型位点检测相关的标记命名为ASM-W，片段大小466bp，如SEQ ID No.1所示；对应的突变位点检测相关的标记命名为ASM-m，片段大小466bp，SEQ IDNo.2所示。
2.一种用于鉴别权利要求1中所述与烟草PVY抗性紧密连锁的分子标记的引物，其特征在于：引物序列如下：
正向引物FW：5'-CCTAAGCATCCATTAGAGAATTCcTG-3'；
正向引物Fm：5'-CCTAAGCATCCATTAGAGAATTCgTC-3'；
反向引物RWm：5'-CAGGAGCTATTCAAAACCATAATTCAAC-3'；
这三个引物有以下两种组合：
正向引物FW和反向引物RWm的组合用于扩增分子标记ASM-W；
正向引物Fm和反向引物RWm的组合用于扩增分子标记ASM-m。
3.权利要求1所述的与烟草PVY抗性紧密连锁的分子标记在鉴别烟草eIF4E-1基因位点的基因型中的应用。
4.权利要求2所述的引物在鉴别烟草eIF4E-1基因位点的基因型中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，具体应用方式为：利用FW+RWm组合和Fm+RWm组合这两套引物，对待测个体的基因组DNA进行两次PCR扩增，检测扩增片段的有无；
如果Fm+RWm组合扩增出466bp特异扩增条带，而FW+RWm组合扩不出则为纯合突变型；
如果FW+RWm组合扩增出466bp特异扩增条带，而Fm+RWm组合扩不出则为野生型；
如果FW+RWm组合和Fm+RWm组合均能扩增出466bp特异扩增条带，则为杂合突变型。
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