[发明专利]一种小鼠来源的胃癌细胞系NCCG1、建立方法及其应用

说明书

本发明公开了一种鼠源胃癌细胞系NCCG1，建立方法及其应用。本发明的胃癌细胞系保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：C2020165。本发明的鼠源胃癌细胞系具有稳定的细胞生物学特性，可在免疫缺陷小鼠内能够形成肿瘤，作为一种良好的细胞模型和动物模型可直接应用于细胞生物学、分子生物学、抗肿瘤药物筛选、新药研发等相关重要研究。

技术领域

本发明涉及细胞培养领域，具体涉及一种小鼠来源的胃癌细胞系(NCCG1)、建立方法及其应用。

背景技术

胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，在我国发病率居各类肿瘤的首位，全世界每年约有17万人死于胃癌。由于胃癌的具体发生机制尚未完全阐明，也缺乏有效的治疗手段，进展期胃癌5年生存率仅20％～30％。

建立肿瘤细胞系是研究肿瘤致关重要的环节。细胞系广泛应用于生物学各个研究领域。它是指直接从生物体的组织中分离培养出细胞，为后续研究提供稳定细胞系的一种方法。细胞系是研究特定细胞的生长、代谢、调控特性，细胞与细胞间相互作用，细胞与基质的相互作用等有效的研究材料。人类的第一株连续细胞系是1951年由George Otto Gey实验室建立的子宫颈癌细胞系(Hela)，这株细胞系的建立是人体细胞体外培养的里程碑，Hela细胞推进了细胞、基因、病毒、疫苗等许多研究领域的进程，也加深了人们对肿瘤的认识：发现肿瘤的各种特性、研究肿瘤发生发展的原因和过程、筛选抗癌药物等。除了研究细胞本身的特性和癌症的发生发展外，还应用于遗传、免疫、分化、发育的研究领域。此外，国内外不少企业还可以利用细胞进行生产各种因子、蛋白等。细胞的广泛应用推动了细胞生物学的蓬勃发展。

肿瘤(细胞/动物)模型的建立加速了现代肿瘤学的研究进程，也使我们对肿瘤性疾病的演变过程有了更深入的了解。构建理想的肿瘤模型有助于探索胃癌的具体发病机制并为治疗提供理论依据。肿瘤细胞系及皮下荷瘤是目前最常用的肿瘤模型，将肿瘤细胞系移植到同种或异种动物的皮下形成肿瘤块，进而开展实验研究。因此在胃癌的研究中，使用不同类型的胃细胞系作为研究肿瘤异质性、多样性等具有重要意义。然而，目前胃癌细胞系相对较少，并且多数都是人肿瘤组织来源的细胞系，鼠源肿瘤细胞系具有成瘤率高、生长速度快、载瘤鼠种选择广泛等优点。但目前可用鼠源胃癌细胞系少见，常用的也仅有MFC小鼠胃癌细胞系，但MFC细胞系是1985年由钱书森教授构建，目前已经传代超过数百代，细胞本身可能已经发生突变或污染。本发明的细胞系，具有生长速度稳定、裸鼠成瘤率高等特点，可填补我国鼠源胃癌细胞系缺乏的现状，为胃癌的研究提供良好的肿瘤模型，可作为肿瘤病因与预防、检测试剂盒、新药研发等工具细胞，助力癌症预防与治疗。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术存在的缺陷，提供一种胃癌细胞系，具体涉及胃癌细胞系NCCG1及其建立方法。

本发明建立了的胃癌细胞系可稳定传代，成瘤性好，能适用于建立动物模型。该细胞系可用于胃癌的发生发展及转移机制，耐药原理及新药筛选等的研究。

根据本发明的一个方面，本发明提供了一种鼠源胃癌细胞系，其保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2020165。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了前面所述的胃癌细胞系的子代细胞。

根据本发明的又一个方面，本发明提供了胃癌细胞系的建立方法，其特征在于，所述建立方法包括如下步骤：

1)致癌剂诱导小鼠成瘤；

2)将步骤1)中形成的肿瘤组织接种到免疫缺陷小鼠身上成瘤；

3)将步骤2)中形成的肿瘤细胞体外培养，形成稳定的胃癌细胞系。

优选地，所述致癌剂包括4NQO、N-甲基-N'-硝基-亚硝基胍，化学酸(硝酸或盐酸)，乙醇，幽门螺旋杆菌。上述致癌剂可单独应用也可联合应用。