[发明专利]一种基于拉曼光谱技术检测桑椹中花色素苷的方法

权利要求书

1.一种基于拉曼光谱技术检测桑椹中花色素苷的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)采用拉曼光谱仪分别采集矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、矢车菊素-3-O-芸香糖苷、天竺葵素-3-O-葡萄糖苷及混合花色素苷的标准溶液拉曼谱图；

2)采用拉曼光谱仪采集桑椹样品的原始拉曼光谱图；

3)将桑椹样品的拉曼光谱图与4种标准溶液拉曼谱图进行比对，确定拉曼特征峰；

4)测定桑椹样品的花色素苷含量，作为参考值；

5)对桑椹样品的原始拉曼光谱图进行预处理得到样品预处理谱图，并对桑椹样品预处理谱图进行特征波长筛选，筛选出特征光谱变量；

6)结合特征光谱变量与参考值采用支持向量机回归(SVR)或偏最小二乘回归(PLSR)的方法建立定量预测模型；

7)利用拉曼光谱仪和定量预测模型对桑椹中的花色素苷进行定量检测。

2.根据权利要求1所述的一种基于拉曼光谱技术检测桑椹中花色素苷的方法，其特征在于，所述步骤1)标准溶液均采用纯水配制，且纯度均大于95％；

所述混合花色素苷标准溶液中矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、矢车菊素-3-O-芸香糖苷与天竺葵素-3-O-葡萄糖苷的含量比为45：45：10。

3.根据权利要求1所述的一种基于拉曼光谱技术检测桑椹中花色素苷的方法，其特征在于，所述拉曼光谱仪的采集参数为激发波长785nm，激光功率300-350mW，平均次数1-5次，积分时间1000-5000ms。

4.根据权利要求1所述的一种基于拉曼光谱技术检测桑椹中花色素苷的方法，其特征在于，采用拉曼光谱仪采集拉曼图谱时将标准溶液或样品溶液置于石英比色皿中，石英比色皿与拉曼探头的间距为3-5mm。

5.根据权利要求1所述的一种基于拉曼光谱技术检测桑椹中花色素苷的方法，其特征在于，所述步骤3)中桑椹总花色素苷的拉曼特征峰位置为545cm^-1、634cm^-1、737cm^-1。

6.根据权利要求1所述的一种基于拉曼光谱技术检测桑椹中花色素苷的方法，其特征在于，将799cm^-1处的拉曼峰作为矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的拉曼特征峰，842cm^-1、987cm^-1处的拉曼峰作为天竺葵素-3-O-葡萄糖苷的拉曼特征峰，将桑椹样品拉曼图谱与标准花色素苷拉曼图谱相比，部分峰位发生偏移，偏移在10cm^-1以内，根据在799cm^-1、842cm^-1和987cm^-1处10cm^-1以内是否有拉曼峰鉴别桑椹样品中是否含有矢车菊素-3-O-葡萄糖苷和天竺葵素-3-O-葡萄糖苷。

7.根据权利要求1所述的一种基于拉曼光谱技术检测桑椹中花色素苷的方法，其特征在于，所述步骤4)采用pH示差法测定桑椹样品的总花色素苷含量。

8.根据权利要求1所述的一种基于拉曼光谱技术检测桑椹中花色素苷的方法，其特征在于，所述步骤5)中图谱预处理方法为多元散射校正(MSC)、基线校正(airPLS)、归一化(Normalized)中的一种或几种的组合。

9.根据权利要求8所述的一种基于拉曼光谱技术检测桑椹中花色素苷的方法，其特征在于，所述步骤5)采用竞争性自适应重加权算法(CARS)对桑椹样品预处理谱图进行特征波长筛选，且波长范围选择400-1800cm^-1。

10.根据权利要求1所述的一种基于拉曼光谱技术检测桑椹中花色素苷的方法，其特征在于，所述步骤6)采用支持向量机回归(SVR)建立花色素苷的定量预测模型，所述支持向量机回归采用RBF核函数，且惩罚因子C为32.0，核系数g为0.001。