[发明专利]一种用于手性色氨酸检测的外延栅极场效应晶体管传感器制备及检测方法在审
申请号: | 202011151882.3 | 申请日: | 2020-10-22 |
公开(公告)号: | CN112326760A | 公开(公告)日: | 2021-02-05 |
发明(设计)人: | 肖殷;李乐;王勇 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | G01N27/414 | 分类号: | G01N27/414 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 王丽 |
地址: | 300350 天津市津南区海*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 手性 色氨酸 检测 外延 栅极 场效应 晶体管 传感器 制备 方法 | ||
1.一种用于检测手性色氨酸分子的外延栅极场效应晶体管传感器,其特征是将外延栅极浸泡在牛血清白蛋白溶液中,栅极表面形成一层有序的牛血清白蛋白分子,完成手性分离介质的固定,制得手性传感芯片,为牛血清白蛋白外延栅极场效应晶体管生物传感器。
2.一种用于检测手性色氨酸分子的外延栅极场效应晶体管传感器制备方法,其特征是,包括以下步骤:
(1)外延栅极的制备:使用丙酮,乙醇,异丙醇或其他有机溶剂超声清洗玻璃基底达到清除表面污物的效果;然后在乙醇溶液中煮沸,氮气吹干后在玻璃基板上蒸镀Au薄膜;
(2)修饰外延栅极:配制1~10mg/mL的蛋白质溶液,外延栅极浸泡其中1~12h后取出,用去离子水冲洗,除去物理吸附的牛血清白蛋白,在Au表面形成蛋白质分子层;
(3)制备用于储存分析液的PDMS样品池:将A胶与B胶均匀混合,抽真空除气泡后倒入盛有模具的容器中,升温固化后制得样品池,利用PDMS与Au的粘附力可固定于修饰后的外延栅极上。
3.如权利要求2所述的方法,其特征是,步骤(1)玻璃片的长为0.5cm~2.5cm,宽为0.5cm~2.5cm,高为0.2cm~0.5cm,超声清洗时间为10~20min,乙醇煮沸时间为10~20min,真空度为10-4Pa,Au膜的厚度为80~100nm,蒸镀速率为
4.如权利要求2所述的方法,其特征是,步骤(2)使用的磷酸盐缓冲溶液浓度为10mM,pH=7.2,牛血清白蛋白溶液浓度为1~10mg/mL,浸泡时间为1~12h。
5.如权利要求2所述的方法,其特征是,步骤(3)A胶:B胶质量比为10:1~1:1,温度为20~100℃,固化时间为30~60min。
6.利用权利要求1的传感器检测手性色氨酸分子的方法;其特征是,包括以下步骤:
(1)手性色氨酸分析液配制:使用磷酸盐缓冲溶液将D-或L-色氨酸配制成不同浓度标准溶液,浓度为0~10μM;
(2)器件转移特性曲线测试:测试修饰牛血清白蛋白后外延栅极场效应晶体管转移特性曲线;
(3)实时基线测试:固定测试栅压、源漏电压,向样品池中加入PBS缓冲液,测试获得的实时漏极电流曲线作为基线I0;
(4)手性色氨酸的实时检测:固定测试栅压、源漏电压,向样品池中加入0~10μM浓度的D-或L-色氨酸,用MOS管漏极电流变化量(I-I0)评估传感器对不同浓度的手性色氨酸溶液实时感测结果。
7.如权利要求6所述的方法,其特征是,所述步骤(2)重复测试次数为3次。
8.如权利要求6所述的方法,其特征是,所述步骤(1)、步骤(3)、步骤(4)中使用的磷酸盐缓冲溶液浓度为0.1mM~10mM。
9.如权利要求6所述的方法,其特征是,所述步骤(3)、步骤(4)设定的栅压,源漏电压皆为1~2V。
10.如权利要求6所述的方法,其特征是,所述步骤(3)、步骤(4)每个浓度使用的分析液体积为10~30μL。
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