[发明专利]一种中性三七多糖NPPN的纯化方法、结构表征及应用

说明书

本发明公开了一种中性三七多糖NPPN的纯化方法、结构表征及应用，包括阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖，其摩尔比为1:(4.12):(17.04):(0.18)，主链由1,4‑Glcp糖残基构成，同时还包含T‑Glcp，1,4‑Manp，1,6‑Glcp，1,6‑Galp糖残基，支链由Galp以1→3,4，1→4,6糖苷键连接而成。本发明以大孔吸附树脂对三七粗多糖进行脱色处理，可去除多糖样品中所含色素及杂质，为三七多糖的生物学活性研究奠定了基础，也为三七补血的药效物质基础研究提供了参考依据。

技术领域

本发明涉及天然药物制备技术领域，具体地说是一种中性三七多糖NPPN的纯化方法、结构表征及应用。

背景技术

三七，为五加科人参属植物三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根和根茎，道地产地云南文山，其药用历史悠久，具有补血、止血、活血化瘀、消肿定痛等功效，是传统名贵中药材。三七有效成分包括：皂苷，多糖、黄酮类、炔醇类以及挥发油等。据调查，每年约有1400吨三七用于提取三七总皂苷，当前药渣大多被废弃。而研究发现，从药渣中提取三七多糖的得率为1.71％，如果直接将药渣废弃，则大量具有生物活性的三七多糖资源也将随之废弃，会对三七资源造成极大的浪费，不利于三七资源的充分利用。

申请号为201811044098.5和201710459344.2两项专利也是本发明专利的发明人所申报，公开了一种中性三七多糖NPPN的提取纯化方法。上述两个专利以水提醇沉法提取三七粗多糖，DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析纯化三七粗多糖得中性三七多糖及酸性三七多糖，并发现中性三七多糖具有促进细胞增殖和抗肿瘤的活性。但以上述两个专利所述方法提取到的中性三七多糖含量为93.6％，纯度不够，本发明专利增加了大孔吸附树脂AB-8的纯化工艺，中性三七多糖含量达到96.4％，本发明专利还对中性三七多糖NPPN的结构表征进行了研究，而且还发现中性三七多糖(Neutral polysaccharide fromPanax notoginseng,NPPN)对化药引起的骨髓抑制小鼠造血功能有保护作用。

申请号为201210058942.6的专利公开了一种三七多糖的提取方法。该专利以三七为原料，乙醇提取皂苷后，热水提取粗多糖，以树脂柱及超滤膜对三七多糖进行了纯化，并以HPLC分析单糖组成，红外光谱及核磁共振法对多糖结构进行了初步分析。但该专利尚未对三七多糖进行细分，并未将中性三七多糖与酸性多糖进行有效的分离，且对三七多糖结构的研究不够深入，缺乏系统性。

申请号为201910443332.X的专利公开了一种三七多糖的提取方法。该专利以三七药材为原料，70％乙醇提取，三氟甲磺酸促进大分子多糖水解，得多糖粗提液并以阳离子交换树脂纯化。该专利所述方法集中于对小分子三七多糖的提取。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有的缺陷，提供一种中性三七多糖NPPN的纯化方法、结构表征及应用，将中性三七多糖与酸性多糖进行有效的分离，有效解决背景技术中的问题。

一种中性三七多糖NPPN，包括阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖，其摩尔比为1:(4.12):(17.04):(0.18)，主链由1,4-Glcp糖残基构成，同时还包含T-Glcp，1,4-Manp，1,6-Glcp，1,6-Galp糖残基，支链由Galp以1→3,4，1→4,6糖苷键连接而成。

具体地，中性三七多糖NPPN的提取纯化方法，包括以下步骤：

A将提取过的三七总皂苷后的药渣采用水提醇沉法提取三七多糖粗提液，减压浓缩，冷冻干燥得三七粗多糖，

B将所述三七粗多糖纯化水溶解后以大孔吸附树脂AB-8脱色；

C进一步以阴离子交换层析法及透析法对脱色后三七粗多糖进一步纯化，经冷冻干燥得中性三七多糖。