[发明专利]核酸分子及其应用

权利要求书

1.一种核酸分子，其特征在于，包括：

主链，所述主链中含有核苷酸，所述主链的磷酸骨架上具有至少一个硫代磷酸酯修饰；

荧光基团对，所述荧光基团对中的两个基团分别与所述核酸分子两个末端相连，所述荧光基团对中的两个基团之间可以发生荧光共振转移；

所述核酸分子为gRNA；

所述gRNA 5’端的至少一部分序列与靶标核酸序列相同，并且在5’端形成发卡结构，所述发卡结构使得所述gRNA不能与所述靶标核酸序列结合；

所述gRNA 经次氯酸根切割后能与所述靶标核酸序列结合；

所述与靶标核酸序列相同的片段上具有至少一个硫代磷酸酯修饰。

2.根据权利要求1所述的核酸分子，其特征在于，所述荧光基团对包括下列至少之一：

5' 6-FAM/3' BHQ1、5' 6-FAM/3' BHQ2、5' 6-FAM/3' TAMRA、5' 6-FAM/3' Dabcyl、5'6-FAM/3' Eclipse、5' 6-FAM/3' MGB、5' TET/3' BHQ1、5' TET/3' BHQ2、5' TET/3'TAMRA、5' TET/3' Dabcyl、5' TET/3' MGB、5' JOE/3' BHQ1、5' JOE/3' BHQ2、5' JOE/3'TAMRA、5' JOE/3' Dabcyl、5' JOE/3' MGB、5' HEX/3' BHQ1、5' HEX/3' BHQ2、5' HEX/3'TAMRA、5' HEX/3' Dabcyl、5' HEX/3' Eclipse、5' HEX/3' MGB、5' VIC/3' BHQ1、5' VIC/3' BHQ2、5' VIC/3' MGB、5' CY3/3' BHQ2、5' CY3/3' Dabcyl、5' CY3/3' MGB、5' TAMRA/3' BHQ2、5' TAMRA/3' Dabcyl、5' TAMRA/3' Eclipse、5' TAMRA/3' MGB、5' ROX/3'BHQ2、5' ROX/3' Dabcyl、5' ROX/3' Eclipse、5' ROX/3' MGB、5' Texas Red/3' BHQ2、5'Texas Red/3' Dabcyl、5' Texas Red/3' MGB、5' Quasar 670/3' BHQ2、5' Quasar 670/3' BHQ3、5' CY5/3' BHQ2、5' CY5/3' BHQ3、5' CY5/3' Dabcyl、5' CY5/3' MGB和5'CY5.5/3' BHQ2。

3.根据权利要求1所述的核酸分子，其特征在于，所述主链上的硫代磷酸酯修饰为1~10个。

4.根据权利要求1所述的核酸分子，其特征在于，

所述gRNA 5’端具有与靶标序列相同的片段，所述与靶标核酸序列相同的片段长度为10 nt-20 nt。

5.一种检测样品中次氯酸根的方法，其特征在于，所述方法用于非诊断目的，包括：

将权利要求1~4任一项所述的核酸分子与待测样品接触，以便获得待检测试剂；

检测待检测试剂的荧光强度，并与检测结果确定所述待测样品中是否含有次氯酸根和/或次氯酸根含量。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，进一步包括：

利用含有不同浓度次氯酸根的标准品与所述核酸分子接触，并检测荧光强度，以便绘制标准曲线；

将待检测试剂的荧光强度与标准曲线比对，以便获得待检测试剂中次氯酸根的含量；

任选地，所述荧光强度不小于3a.u时是待测样品中含有次氯酸根的指示，所述荧光强度和次氯酸浓度成正相关。

7.一种检测样品中次氯酸根的试剂盒，其特征在于，包括：权利要求1~4任一项所述的核酸分子。

8.根据权利要求1~4、7任一项所述的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子呈可注射，或者所述核酸分子是以脂质、溶液形式呈现的。

9.一种基因编辑系统，其特征在于，包括：权利要求1~4任一项所述的核酸分子，

可选的，进一步包括：Cas蛋白，所述Cas蛋白以DNA、RNA、多肽和蛋白质至少之一的形式存在，所述Cas蛋白包括选自Cas9、Cas12a、Cas12b和Cas13至少之一；

可选地，进一步包括：志愿分子，所述志愿分子作为模板进行所述核酸分子的损伤修复，所述志愿分子以DNA和RNA至少之一的形式存在。