[发明专利]一种糖尿病灵长类动物模型构建方法

说明书

本发明提供了一种糖尿病灵长类动物模型构建方法。该方法是按照小剂量递增方法给食蟹猴注射链脲佐菌素，同时饲喂高糖高脂饲料，在给食蟹猴注射链脲佐菌素和饲喂高糖高脂饲料一段时间后，增加夜间光照，诱导食蟹猴成为糖尿病模型。采用该方法1.5～6个月成功建立了糖尿病猴模型，该模型具有胰岛素抵抗及高血糖这两个糖尿病的核心特征，且高血糖持续时间久，超过200天还未见下降。本发明所建立的动物模型可用于持续时间较长的动物实验当中，而且可作为成熟的动物模型外售产生经济效益。

技术领域

本发明属于糖尿病动物模型技术领域，具体涉及一种糖尿病灵长类动物模型构建方法。

背景技术

糖尿病是一种常见病，由于胰岛素不足或/和胰岛素作用(抵抗)而导致血糖增高及其他代谢紊乱，在其致病因素中遗传因素和环境因素各占50％。研究糖尿病的发病机制以及潜在的治疗手段，需要合适的动物模型。目前糖尿病研究多采用啮齿类动物模型(大、小鼠)，造模方法有自发和化学诱导等方法，但啮齿类动物与人类的亲缘关系较远，昼夜节律、个体大小、寿命、糖代谢激素的作用等均与人类具有较大差异，因此，该类动物模型获得数据并不适于人类糖尿病机理及其并发症的研究。

非人灵长类动物(猴)在遗传基因方面与人具有很大的同源性，其形态结构、生理机能和生化代谢均与人类非常相似，以猴作为研究对象制备的糖尿病模型可以模拟人类数据信息，具有重要参考价值。目前已报道的非人灵长类动物(猴)糖尿病模型主要有高糖高脂饮食诱导(CN103478071A)，光照诱导(CN108812525A)，以及注射链脲佐菌素(STZ)诱导等方式。通过上述诱导方式制备糖尿病模型存在以下缺点：1.通过高糖高脂饮食诱导构建糖尿病模型的周期较长达2年以上，且成模率低，不及5％；2.通过光照诱导构建糖尿病模型周期缩短，但成模率差异较大，且存在模型动物死亡现象；3.通过注射链脲佐菌素构建糖尿病模型对用药剂量和注射方式要求较高，否则容易导致模型动物死亡或难以成模或成模后很快转阴，造模成功率差异较大。

发明内容

本发明的目的是提供一种糖尿病灵长类动物模型构建方法。采用该方法1.5～6个月成功建立了糖尿病猴模型，该模型具有胰岛素抵抗及高血糖这两个糖尿病的核心特征，且高血糖持续时间久，超过200天还未见下降。

为实现上述目的，本发明采用如下的技术方案：

一种糖尿病灵长类动物模型构建方法，是采用递增剂量注射链脲佐菌素，结合高糖高脂饲料喂养，以及后期夜间光照的方式诱导动物成为糖尿病模型。

进一步的，所述的糖尿病灵长类动物模型构建方法，包括以下步骤：按照小剂量递增方法给动物注射链脲佐菌素，同时饲喂高糖高脂饲料，在给动物注射链脲佐菌素和饲喂高糖高脂饲料一段时间后，增加夜间光照，诱导动物成为糖尿病模型。

上述的方法中，所述的按照小剂量递增方法给动物注射链脲佐菌素，是采用后肢静脉注射方式，每周注射一次，剂量按照2mg/kg、4mg/kg、6mg/kg、8mg/kg、10mg/kg递增，至10mg/kg时视血糖情况继续按10mg/kg剂量给药或者增加至20mg/kg给药，造模过程中给药剂量调整视血糖情况随时调整，连续注射6个月。

所述的高糖高脂饲料按质量百分含量计包括以下成分：玉米粉13～18％、豆粕粉2～6％、麸皮2～5％、钙粉0.1～0.5％、磷酸氢钙0.2～0.6％、膨化大豆粉2～5％、灵长复合维生素0.05～0.2％、灵长复合矿物质0.1～0.5％、蛋氨酸0.05～0.2％、赖氨酸0.05～0.2％、维生素C0.1～0.3％、氯化胆碱0.1～0.3％、青维素0.05～0.3％、苜蓿草粉0.5～2％、面粉15～25％、猪油12～18％、食品级白砂糖23～32％、胆固醇0.05～0.15％、蒸气鱼粉5～10％。

所述的饲喂高糖高脂饲料是每只动物每天两餐定量饲喂共150g的高糖高脂饲料，饲喂9个月后换成普通饲料喂养。

所述的增加夜间光照是在给动物注射链脲佐菌素和饲喂高糖高脂饲料4个月后进行。