[发明专利]一种基于四重液滴数字PCR检测女性阴道微生物的引物探针组合及其应用有效
| 申请号： | 202011164085.9 | 申请日： | 2020-10-27 |
| 公开（公告）号： | CN112176079B | 公开（公告）日： | 2023-06-23 |
| 发明（设计）人： | 陈雯雯;陈永欣;王纪东;郑佳莹;黄炜塨;刘晓蕾 | 申请（专利权）人： | 深圳大学 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/04;C12Q1/06;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人： | 潘登 |
| 地址： | 518060 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 四重液滴 数字 pcr 检测 女性阴道 微生物 引物 探针 组合 及其 应用 | ||
1.一种基于四重液滴数字PCR检测女性阴道微生物的引物探针组合，其特征在于，所述引物探针组合由扩增及检测惰性乳杆菌的folE基因、詹式乳杆菌的gapR基因、卷曲乳杆菌的CbiQ1基因和格式乳杆菌的murQ基因的引物对和探针组成；
扩增所述folE基因的引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.1～2所示；
扩增所述gapR基因的引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.3～4所示；
扩增所述CbiQ1基因的引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.5～6所示；
扩增所述murQ基因的引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.7～8所示；
检测所述folE基因的探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示；
检测所述gapR基因的探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示；
检测所述CbiQ1基因的探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示；
检测所述murQ基因的探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示。
2.根据权利要求1所述的引物探针组合，其特征在于，所述探针的5′端修饰有发光的报告荧光基团，3′端修饰有荧光淬灭基团。
3.根据权利要求2所述的引物探针组合，其特征在于，所述发光的报告荧光基团包括FAM、HEX、TET、JOE、CY3或CY5中的任意一种。
4.根据权利要求2所述的引物探针组合，其特征在于，所述荧光淬灭基团包括MGB、BHQ1、BHQ2或BHQ3中的任意一种。
5.根据权利要求1～4任一项所述的引物探针组合，其特征在于，检测所述folE基因的探针的工作浓度为100～400nM；
检测所述gapR基因的探针的工作浓度为200～500nM；
检测所述CbiQ1基因的探针的工作浓度为100～400nM；
检测所述murQ基因的探针的工作浓度为200～500nM。
6.如权利要求1～5任一项所述的引物探针组合在制备女性阴道微生物分型检测试剂盒中的应用。
7.一种女性阴道微生物分型检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1～5任一项所述的引物探针组合。
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