[发明专利]一种恶臭假单胞菌DB-1及其培养方法和应用

说明书

本发明提供一种恶臭假单胞菌DB‑1及其培养方法和应用，所述恶臭假单胞菌DB‑1为恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida）DB‑1，于2020年7月14日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址为中国武汉武汉大学，保藏编号为CCTCC NO:M 2020311；所述恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida）DB‑1用LB液体培养基在30℃、170 r/min振荡培养24h；所述恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida）DB‑1用于降解养殖水体和养殖尾水中的硝酸盐和总氮。本发明的恶臭假单胞菌DB‑1能使养殖水体和养殖尾水中的硝酸盐、总氮明显降低，且对人和养殖动物无害，不产生二次污染，可规模化生产应用于改良水产养殖环境和养殖尾水减量排放。

【技术领域】

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种恶臭假单胞菌DB-1及其培养方法和应用。

【背景技术】

我国是水产养殖大国，养殖产量约占世界养殖产量的68%，其中，池塘养殖产量约占45%。养殖过程中由于大量投喂饲料，导致氮元素在水中的积累，也是养殖水质恶化的主要原因之一。水体中的硝酸盐氮的积累对养殖动物具有一定的潜在的威胁和毒性，特别是在局部缺氧环境中，硝酸盐氮会被转化为亚硝酸盐氮，亚硝酸盐氮的致癌性使得原本毒性很小的污染物毒性增强，造成水质恶化，并伴随着滋生大量的病毒、细菌、浮游生物等微生物，亚硝酸盐浓度过高时容易导致鱼虾等养殖动物大批患病甚至死亡，严重影响水质和水产品安全。另一方面，我国的池塘养殖尾水基本未经处理直接排放，由于养殖尾水中一般都含有较高的总氮，导致了对周边水域环境不同程度的富营养化污染。为改良养殖水质、减少养殖病害发生、减少养殖动物应激、确保养殖安全和保护周边水域生态环境，很多水产养殖者都通过采用微生物制剂来降解水中的硝酸盐和总氮，改善水体环境，缓解水质恶化产生的经济损失及环境污染。众多研究也发现，从养殖废水或养殖污泥中筛选出的土著微生物的脱氮性能更加高效。然而，当前降解硝酸盐和总氮的微生物制剂产品，普遍存在用量偏大、养殖应用成本偏高、降解处理效率偏低和处理效果稳定性较差等问题。因此，急需开发既能高效地降解养殖水体和养殖尾水中的硝酸盐和总氮，又能提高处理效果稳定性和降低使用成本的益生菌。

本申请的所述恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida） DB-1与现有公开专利（专利号为CN200610140871.9和CN200710049432.1）所公开的恶臭假单胞菌菌株的主要区别与优势在于：

（1）本申请的恶臭假单胞菌DB-1的接种量都明显低于现有菌株的接种量，节约了使用成本；

（2）恶臭假单胞菌DB-1具有较强的降解硝酸盐和总氮的能力，在C/N比值与它们接近或更低的条件下，对硝酸盐和总氮浓度的降解率明显高于现有菌株；

（3）恶臭假单胞菌DB-1是属于厌氧反硝化细菌，不需要提供溶解氧。而现有的菌株都属于好氧反硝化细菌，降解硝酸盐和总氮的过程中必须提供一定浓度的溶解氧。

（4）恶臭假单胞菌DB-1可广泛应用于降解极低C/N比值的养殖水体（C/N＜1）中的硝酸盐和总氮浓度，在不投放补充碳源的条件下，仍然具有较高的降解率：24h硝酸盐氮浓度的降解率59.6%、总氮浓度的降解率45.0%。

【发明内容】

本发明要解决的技术问题，在于提供一种恶臭假单胞菌DB-1及其培养方法和应用，该菌株既能高效地降解养殖水体和养殖尾水中的硝酸盐和总氮，又能提高处理效果稳定性和降低使用成本，具有运行成本较低，不产生二次污染等优点。

本发明是这样实现的：