[发明专利]Wxc型糯高粱的ARMS-PCR引物及其分子检测方法在审
申请号: | 202011165598.1 | 申请日: | 2020-10-27 |
公开(公告)号: | CN112176093A | 公开(公告)日: | 2021-01-05 |
发明(设计)人: | 罗爱民;邓锐杰;朱小颖;吴茗花 | 申请(专利权)人: | 四川大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 | 代理人: | 宫建华 |
地址: | 610000 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | wxc 高粱 arms pcr 引物 及其 分子 检测 方法 | ||
1.Wxc型糯高粱的ARMS-PCR引物,包括Wxc-F、Wxc-R,其核酸序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2所示。
2.Wxc型糯高粱的ARMS-PCR分子检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)ARMS-PCR引物对Wxc-F、Wxc-R的设计;
(2)样品总DNA的提取,利用S1的引物进行ARMS-PCR扩增反应;
(3)采用琼脂糖凝胶电泳法检测扩增产物,根据凝胶成像系统上成像判定检测结果,若有条带生成,则表明该样品中含Wxc型糯高粱;若无条带生成,则表明该样品中不含Wxc型糯高粱。
3.根据权利要求2所述的Wxc型糯高粱的ARMS-PCR分子检测方法,其特征在于,步骤(2)中,所述扩增反应的体系:10μL 2×PCR Master,1μL DNA模板,1μL Wxc-F,1μL Wxc-R,SterileddH2O补齐到20μL。
4.根据权利要求2或3所述的Wxc型糯高粱的ARMS-PCR分子检测方法,其特征在于,步骤(2)中,所述扩增反应的条件为:94℃预变性3min,之后进行32个循环的94℃30s、50℃30s、72℃30s,最后进行72℃终止延伸7min。
5.根据权利要求2所述的Wxc型糯高粱的ARMS-PCR分子检测方法,其特征在于,步骤(3)中,所述琼脂糖凝胶电泳判别的方法是:取5μL的ARMS-PCR扩增产物,加入1μL 6×Loadingbuffer,混匀,加入到3%的琼脂糖凝胶中,于150V电压下电泳30min,在凝胶成像系统上成像观察结果。
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