[发明专利]新型冠状病毒SARS-CoV-2的检测蛋白组及应用在审
申请号: | 202011165862.1 | 申请日: | 2020-10-27 |
公开(公告)号: | CN112666348A | 公开(公告)日: | 2021-04-16 |
发明(设计)人: | 仝舟;高山;杨勃;张德梅;张智超;闫红 | 申请(专利权)人: | 山西高等创新研究院 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/543 |
代理公司: | 北京知鲲知识产权代理事务所(普通合伙) 11866 | 代理人: | 李光平 |
地址: | 030032 山西省太*** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 新型 冠状病毒 sars cov 检测 蛋白组 应用 | ||
1.一种新型冠状病毒SARS-CoV-2的检测蛋白组,其特征在于,包括:
(1)、氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的N蛋白,和/或氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的S蛋白RBD 331aa-532aa区域;
(2)、如(1)中所述的氨基酸序列中经过至少一个氨基酸的取代、缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质。
2.一种与权利要求1所述的蛋白组相关的生物材料,其特征在于,包括如下任意一种:
a1、编码权利要求1所述的蛋白组的基因;
a2、含有a1中所述的基因的表达盒;
a3、含有a1中所述的基因或a2中所述的表达盒的重组载体;
a4、含有a1中所述的基因、a2中所述的表达盒或a3中所述的重组载体的微生物。
3.根据权利要求2所述的生物材料,其特征在于,编码权利要求1所述的蛋白组的基因如下任意一种:
b1、N蛋白的基因核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,S蛋白RBD 331aa-532aa区域的基因核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示;
b2、与b1中的基因序列具有85%以上的同源性,且能够编码权利要求1所述的蛋白组。
4.权利要求1中所述的蛋白组或权利要求2或3所述的生物材料在制备检测新型冠状病毒SARS-CoV-2的产品中的用途;
可选的,所述的产品为引物、探针或试剂盒。
5.一种新型冠状病毒SARS-CoV-2的酶联免疫吸附检测试剂盒,其特征在于,包括权利要求1中所述的蛋白组。
6.根据权利要求5所述的新型冠状病毒SARS-CoV-2的酶联免疫吸附检测试剂盒,其特征在于,包括:含3-5wt%脱脂奶粉的磷酸盐吐温缓冲液、包被液、封闭液、显色剂、终止液、空白对照、阴性对照、阳性对照或二抗中的至少一种;
可选的,封闭液为含5wt%脱脂奶粉的磷酸盐吐温缓冲液;
可选的,显色剂为3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液;
可选的,空白对照为含3wt%脱脂奶粉的磷酸盐吐温缓冲液;
可选的,阴性对照为使用3wt%脱脂奶粉的磷酸盐吐温缓冲液稀释10000倍的无关抗体;
可选的,阳性对照为使用3wt%脱脂奶粉的磷酸盐吐温缓冲液稀释10000倍的新型冠状病毒单抗;
可选的,二抗为山羊抗兔IgM、山羊抗兔IgG、山羊抗人IgM或山羊抗人IgG。
7.一种新型冠状病毒SARS-CoV-2的酶联免疫吸附检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1:使用纯化后的N蛋白和S蛋白RBD 331aa-532aa区域制备预包被新冠病毒抗原的包被板;
S2:在包被板中分别加入待测样品、阴性对照、阳性对照和空白对照,进行一抗孵育,并洗板;
S3:在包被板中分别加入山羊抗兔IgM、山羊抗兔IgG、山羊抗人IgM和山羊抗人IgG进行二抗孵育,并洗板;
S4:加显色剂显色后,加入终止液,读板。
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