[发明专利]一种MBP重组蛋白以及其应用

权利要求书

1.一种MBP重组蛋白，其特征在于，氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，或与该氨基酸序列有至少80％一致性的氨基酸序列。

2.一种编码权利要求1所述MBP重组蛋白的基因；优选的，所述基因核酸序列如SEQ IDNo.2所示，或与该核酸序列有至少80％一致性的核酸序列。

3.一种含权利要求2所述基因的重组质粒；优选的，所述重组质粒采用mEGFP标记MBP重组蛋白的完整开放阅读框架。

4.一种含权利要求3所述重组质粒的细胞株或重组菌；优选的，所述细胞株为权利要求3所述重组质粒转染AD293细胞所得。

5.一种检测MBP抗体的试剂盒，其特征在于，包括权利要求3所述重组质粒，或权利要求4所述的细胞株或重组菌；优选的，所述试剂盒还包括AD293细胞株、2％多聚甲醛、5％的羊血清白蛋白的PBS溶液、标记的山羊抗人IgG。

6.一种MBP抗体检测试剂的制备方法，其特征在于，包括对权利要求4所述的细胞株进行培养步骤，以及固定步骤、封闭步骤、孵育步骤和封片步骤。

7.权利要求6所述的方法，其特征在于，所述固定步骤为当细胞密度为70-80％时，采用2-5％多聚甲醛20-30℃固定10min；优选地，所述细胞密度为75％时采用2％多聚甲醛25℃固定。

8.权利要求6-7任一所述的方法，其特征在于，所述封闭步骤为采用5％的羊血清白蛋白的PBS溶液20-30℃封闭1h；优选地，采用5％的羊血清白蛋白的PBS溶液25℃封闭。

9.权利要求6-8任一所述的方法，其特征在于，所述孵育步骤包括一抗孵育、二抗孵育，其中所述一抗孵育为加入采用封闭液倍增稀释的待测血清(1：20)，3-5℃孵育14-20h；优选地，所述一抗孵育采用4℃孵育15h；所述二抗孵育为采用标记的山羊抗人IgG避光20-30℃孵育50-60min；优选地，所述二抗孵育采用25℃孵育60min。

10.一种检测MBP抗体的方法，其特征在于，所述方法包括权利要求6-9任一所述方法，并进一步包括荧光检测步骤。

11.权利要求1所述蛋白、权利要求2所述基因、权利要求3所述重组质粒，或权利要求4所述的细胞株或重组菌在制备MBP抗体检测试剂中的应用。