[发明专利]一种用于猪蓝耳病毒全基因组测定的成套引物对及其应用

说明书

本发明公开了一种用于猪蓝耳病毒全基因组测定的成套引物对及其应用，包括12对引物，通过12引物进行(1)感染猪蓝耳病毒的样品预处理，(2)核酸提取，(3)扩增，(4)分析，本发明不仅可用于猪蓝耳病毒全基因组的扩增与测序，而且还可用于蓝耳病毒的快速检测与鉴定，具有操作简便、特异性强、灵敏度高和准确性好的优点，也为蓝耳病毒的进化分析、分子流行病学研究及科学防控提供了有力的技术手段。

技术领域

本发明涉及检测领域，更具体的说，是一种用于猪蓝耳病毒全基因组测定的成套引物对及其应用。

背景技术

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)又称猪蓝耳病，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive andrespiratory syndrome virus，PRRSV)引起一种猪的传染病疾病，并且在世界范围内给养猪业造成巨大经济损失。1987年，美国首次报道了PRRS的发生，随后几年内PRRS便在全球范围内流行，给养猪业造成巨大经济损失，在欧美等国的一次大流行就造成了上百万头猪的死亡。

我国最早于1995年发现该病。随后PRRS先后在全国各地相继发生，造成危害的范围持续扩大，流行态势呈上升趋势。2006年夏季，我国江西、江苏、安徽、浙江等地部分猪场相继暴发了高发病率和高死亡率的“高热病”，农业部迅即组织专家联合攻关，研究发现新的变异PRRSV引起了以持续高热为主要特征的高致病性PRRS，定名为“高致病性猪蓝耳病”(HP-PRRS)。至2007年8月，全国共有26个省份发病累计病猪25.7万头、病死6.8万头、扑杀17.5万头(农业部新闻发布会)。2009年和2010年在中国及周边东南亚国家再次发生PRRS疫情，给养猪业造成了巨大的经济损失。HP-PRRSV占国内流行毒株的比例在2006至2011年期间，从78.0％上升到88.9％，成为国内优势毒株。2013年，国内发现了在Nsp2基因存在111+1+19个氨基酸不连续缺失的PRRSV毒株，与美国流行毒株NADC30毒株类似，因此将该类毒株命名为NADC30-like毒株，随后NADC30-like毒株逐步在我国流行。

因此，建立一种用于猪蓝耳病毒全基因组测定的成套引物，不仅可以用于临床快速检测与鉴定，而且也为蓝耳病毒的进化分析、分子流行病学研究及科学防控提供了有力的技术手段。

发明内容

本发明提供了一种用于猪蓝耳病毒全基因组测定的成套引物对及其应用。

本发明的方案是：