[发明专利]一种腐生型兰花的快繁和离体保存方法

权利要求书

1.一种腐生型兰花的快繁和离体保存方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)对开花的腐生型兰花进行人工异株授粉，选择授粉后160～200d的未开裂果荚作为外植体；所述腐生型兰花为大根兰(Cymbidium macrorhizon)；

(2)将清洗、消毒后的外植体剥开，使种子散布在无菌萌发培养基表面进行暗培养，长出假根后得萌发种子；所述无菌萌发培养基由以下组分的水溶液组成：花宝1号3g/L、维生素B₆ 0.5mg/L、维生素B₁ 0.1mg/L、烟酸0.5mg/L、甘氨酸2mg/L、肌醇100mg/L、NAA 0.1～0.5mg/L、椰子汁50～100mL/L、蔗糖20g/L和琼脂5.6g/L；所述暗培养的时间为50～120d；所述暗培养的温度均为25±2℃；

(3)待所述萌发种子的根状茎长至0.8～1.2cm时，将所述根状茎转接至根状茎诱导和增殖培养基上进行暗培养，得快繁苗；所述根状茎诱导和增殖培养基由以下组分的水溶液组成：花宝1号3g/L、维生素B₆ 0.5mg/L、维生素B₁ 0.1mg/L、烟酸0.5mg/L、甘氨酸2mg/L、肌醇100mg/L、6-BA 5～10mg/L、KT 2～5mg/L、椰子汁100～200mL/L、蔗糖30g/L、琼脂5.6g/L和活性炭1g/L；所述暗培养的温度均为25±2℃；

(4)将所述萌发种子的根状茎或所述快繁苗的根状茎移植于离体保存培养基中进行离体保存，所述离体保存培养基由以下组分的水溶液组成：花宝1号3g/L、维生素B₆ 0.5mg/L、维生素B₁ 0.1mg/L、烟酸0.5mg/L、甘氨酸2mg/L、肌醇100mg/L、NAA 0.1～0.5mg/L、蔗糖20g/L和琼脂5.6g/L；所述离体保存的温度为25±2℃。

2.根据权利要求1所述快繁和离体保存方法，其特征在于，步骤(2)所述清洗、消毒包括：用纱布擦洗所述外植体的表面，在无菌环境中用体积百分含量为75％的酒精浸泡1min，再用质量百分含量为0.2％的HgCl₂水溶液浸泡10min，之后用无菌水冲洗5次。