[发明专利]一种产几丁质酶的枯草芽孢杆菌菌株SH21、生产几丁质酶的方法、微生物制剂及应用

权利要求书

1.一种生产几丁质酶的方法，其特征在于，所述方法包括利用枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)菌株SH21进行发酵培养；发酵培养基的组成为：麦芽糖2g，酪蛋白胨2g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，KH₂PO₄0.7 g，K₂HPO₄0.3 g，FeSO₄·7H₂O 0.05g和蒸馏水1000mL；

所述菌株的保藏单位为：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏编号为CGMCC NO.18612；保藏时间为2019年9月23日。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵培养的温度为20℃-40℃。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵培养的温度为29℃-30℃。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵培养的发酵时间为24-60h。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵培养的发酵时间为48h。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵培养的初始pH为5-8。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵培养的初始pH为7。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括在发酵之前将菌株接种至种子培养基中培养，所述种子培养基的组成为：蛋白胨10g，酵母浸粉5g，NaCl 10g和蒸馏水1000mL；

所述接种的接种量为1％-3％v/v。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述接种的接种量为1.5％-2.5％v/v。

10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述接种的接种量为2％v/v。

11.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括在发酵培养后进行几丁质酶纯化的步骤：

所述纯化为通过盐析、凝胶过滤色谱和离子交换色谱进行组合纯化。

12.根据权利要求11所述的方法，其特征在于，所述盐析采用硫酸铵进行；

所述凝胶过滤色谱的色谱柱为Superdex 75PG色谱柱；

所述离子交换色谱的色谱柱为SPFocurose HPR。

13.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，所述盐析采用70％-80％硫酸铵。