[发明专利]检测华南虎或蜱虫内巴贝丝虫的通用引物及试剂盒

权利要求书

1.检测华南虎或蜱虫内巴贝丝虫的通用引物，其特征在于：包括两组引物，具体如下：

第一组引物:

Bab-1: 5’-ATCTAAGGAAGGCAGCAGGC -3’

Bab-2: 5’- GAAACGTCCTTGGCAAATGC -3’

第二组引物:

Bab-3: 5’- GTGACAAGAAATAACAATAC-3’

Bab-4: 5’- ACTAAGGTTCAATAACCAAC -3’。

2.一种采用权利要求1所述的检测华南虎或蜱虫内巴贝丝虫的通用引物的巢式PCR鉴定方法，其特征在于：其包括以下步骤：

1）以华南虎血液样品或蜱虫样品基因组DNA为模板，以权利要求1中所述的Bab-1和Bab-2为第一轮引物，进行第一轮PCR；

2)以第一轮PCR产物DNA为模板，以权利要求1中所述的Bab-3和Bab-4为第二轮引物，进行第二轮PCR；

3)取第二轮PCR产物进行1％琼脂糖凝胶电泳鉴定；

4)将第二轮PCR产物进行序列测定；

5)根据NCBI数据库中记载的巴贝丝虫基因序列，进行系统进化分析，最终得出样品鉴定结果。

3.根据权利要求2所述的巢式PCR鉴定方法，其特征在于：所述第一轮PCR的反应条件为：95℃预变性5 min，95℃变性1 min，56℃退火1 min，72℃延伸30s，进行35个循环，最后72℃延伸10 min；

所述第二轮PCR的反应条件为：95℃预变性5 min，95℃变性1 min，56℃退火45s，72℃延伸1min，进行35个循环，最后72℃延伸10 min。

4.检测华南虎或蜱虫内巴贝丝虫的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括权利要求1所述通用引物。