[发明专利]一种铁皮石斛多糖及其制备方法

说明书

本发明公开了一种铁皮石斛多糖及其制备方法，包括铁皮石斛根部，所述铁皮石斛根茎通过水提醇沉法提取粗多糖，结合反复冻融、H2O2脱色、超滤、透析等分离纯化方法,分别得到两种分子量均一的铁皮石斛多糖DOP‑1和DOP‑2，由于DOP‑2粘度相对DOP‑1低,其2D核磁检测相关峰响应较好，经过多重测定后将DOP‑1和DOP‑2进行粉碎，随后加入约220度的水进行浸泡并加热，当DOP‑1和DOP‑2出现分散情况后停止加热，将其中残渣进行过滤，提取浓缩液，将浓缩液采用水提醇沉法去除上面漂浮的清液，随后在高温下进行沉淀干燥，最终得到铁皮石斛多糖，不但提高了铁皮石斛的糖分含量，且在制备过程中更为节省原料，通过羟基自由基与超氧阴离子有效的加快了反应速率。

技术领域

本发明属于铁皮石斛多糖技术领域，具体为一种铁皮石斛多糖及其制备方法。

背景技术

铁皮石斛性微寒，味甘、淡。具有滋阴清热、养胃生津之功效。可用于治疗具有阴虚证的急性及慢性咽喉炎、慢性支气管炎、结核病、甲状腺功能亢进、糖尿病、慢性肝炎、慢性萎缩性胃炎、免疫功能综合征和癌症放化疗调理等病症，并可增强中老抗病能力。

但是现有的技术在对铁皮石斛内部的糖分进行提取时，不但效率低下，且在提取过程中极易造成材料损失，加大了成本。因此需要对铁皮石斛多糖的制备方法加以改进，同时提出一种铁皮石斛多糖及其制备方法，便于更好的解决上述提出的问题。

发明内容

本发明的目的在于：为了解决上述提出的问题，提供一种铁皮石斛多糖及其制备方法。

本发明采用的技术方案如下：

一种铁皮石斛多糖及其制备方法，包括铁皮石斛根部，所述的一种铁皮石斛多糖及其制备方法包括以下步骤：

步骤一：提取多糖，采用水提醇沉法从铁皮石斛根茎中提取粗多糖，结合反复冻融、H2O2脱色、超滤、透析等分离纯化方法,分别得到两种分子量均一的铁皮石斛多糖DOP-1和DOP-2；

步骤二：物质分析，采用苯酚-硫酸法测得DOP-1和DOP-2的糖含量分别为99.47％、97.46％，高效凝胶渗透色谱法测得两种多糖的分子量分别为4.929×105Da、3.339×104Da，通过紫外光谱定性扫描以及蛋白质含量定量检测,发现两种铁皮石斛多糖基本不含核酸和蛋白质，间羟基联苯法确定DOP-1和DOP-2均不含糖醛酸，采用Folin–Ciocalteu法对铁皮石斛多糖的总酚含量进行测定,结果表明DOP-1和DOP-2的总酚含量分别为147.25mg/kg、918.67mg/kg，通过对两种多糖的纯度鉴定可知,DOP-1和DOP-2成分均一,纯度高,满足对多糖类物质结构鉴定的要求；

步骤三：结构单元测定，单糖组成结果表明两种多糖均含有葡萄糖和甘露糖,组成比分别为1.00:1.38、1.00:4.06，高碘酸氧化-Smith降解法的分析结果表明两种多糖末端连接或1.6-连接的糖残基类型含量较低,主要由氧化降解为赤藓醇的1.4-连接或1.4.6-连接的糖残基组成，甲基化分析结果表明,DOP-1的主要连接类型为1,4-连接的葡萄糖和1.4-连接的甘露糖,糖残基比例为1.00:1.78；DOP-2主要由1.4-连接的葡萄糖、1.4-连接的甘露糖和1.6-连接的葡萄糖组成,糖残基比例为1.90:14.10:1.00，结合红外扫描图谱、Smith降解GC结果以及NMR图谱的结果进行分析,表明两种多糖的乙酰基均连在1.4-β-D-Manp的2位或3位,DOP-1和DOP-2的乙酰化比例分别约为50％、30％。由于DOP-2分子量较小,溶解度高,粘度相对DOP-1低,其2D核磁检测相关峰响应较好,可通过1D和2D NMR图谱对DOP-2的结构进一步确定,并推测出DOP-2的重复结构单元；