[发明专利]一种固态富血小板纤维蛋白膜的优化制备方法

说明书

本发明公开了一种固态富血小板纤维蛋白膜的优化制备方法，通过增加采血管管壁亲水性能够有效提高固态富血小板纤维蛋白膜的面积、重量，使膜中的纤维网络更加致密，具有更好的韧性和拉伸强度，同时对固态富血小板纤维蛋白膜加热处理后可以更好的释放生长因子，适当增加采血管管径还可提高固态富血小板纤维蛋白膜中血小板、白细胞的比例，有效延长降解时间，解决了目前富血小板纤维蛋白制备产物体积不足、强度不够等问题，该方法制备的固态富血小板纤维蛋白膜在临床上具有更广的应用前景。

技术领域

本发明属于血液制品技术领域，具体涉及一种固态富血小板纤维蛋白膜的优化制备方法。

背景技术

自体血液提取物应用于创口愈合和组织再生是目前生物再生材料的研究热点，它来源于自身，不会引起机体的排异反应，再生效果好。血液中含有丰富的生长因子、纤维蛋白原、血小板和白细胞等成分。生长因子如血小板衍生生长因子(PGDF)、转化生长因子(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)等在临床上被用于加速软硬组织愈合；血小板在体内发挥着多种生物学作用，一方面促进凝血，另一方面血小板中富含多种蛋白能够促进创伤愈合；白细胞则在机体抵抗炎症和组织再生等方面发挥重要作用。

目前在临床上的自体血液提取物包括第一代的富血小板血浆(Plateletrichplasma，PRP)和第二代富血小板纤维蛋白(Platelet-rich fibrin，PRF)，它们都能够提供机体再生所需要的生长因子和免疫细胞等，因此被应用于临床上骨骼肌损伤的修复、疼痛缓解、牙科手术、毛发再生等多个领域。PRP的制取需要在离心后添加促凝或抗凝成分，导致机体天然成分的破坏，并且多次离心、步骤繁琐、不利于临床应用。而富血小板纤维蛋白的制备不需要添加抗凝剂，一次离心即可得到产物，是更为天然和安全的生物制剂。同时它具有三大优点：含有三维支架结构、活细胞、生长因子，因此具有良好的生物活性。将PRF压制成固态膜后，能够广泛用于医学临床，例如在牙周手术中替代胶原膜促进牙周再生、牙龈萎缩充填、拔牙后位点保存、与骨粉共混形成稳定性骨块、促进糖尿病/肿瘤表皮溃烂的伤口修复、整形美容手术中的充填等。

然而，目前的富血小板纤维蛋白制取技术下，制备的产物强度较低、体积较小，因此可应用范围受限。PRF在制备时，血液最早与管壁接触，因此采血管的性质对产物的形态和成分影响极大。本发明通过增加管壁的亲水性(不受抽血管材质限制：塑料管、玻璃管和钛管等各种抽血管均可)，能够增加血小板对抽血管管壁的贴附，从而激活血液内源性凝血功能，促进PRF内三维纤维网络状膜结构的形成。由于在PRF的形成过程中，不添加任何抗凝剂，只依靠血液内源性凝血机制来形成固态膜，因此形成的膜越坚实，形成的纤维蛋白基质网络就能够包裹更多血小板、白细胞和生长因子，发挥更好的再生效果。

发明内容

针对现有固态富血小板纤维蛋白制备方式的不足，本发明提供了一种固态富血小板纤维蛋白膜的优化制备方法，制备的富血小板纤维蛋白膜具有体积更大、强度更高、有效成分更多的特点，解决了目前富血小板纤维蛋白制备产物体积不足、强度不够等问题。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种固态富血小板纤维蛋白膜的优化制备方法，具体如下：

(1)将采血管亲水性处理后增强其表面亲水性，封装后灭菌；

(2)采集血液，700～1000×g离心5-10分钟，离心后分离出上层黄色凝胶状固体，再将其压制成膜，即获得固态富血小板纤维蛋白膜。

进一步地，所述亲水性处理包括将采血管自组装多层由阳离子层和阴离子组成的双电层，或者浓硫酸或食人鱼溶液浸泡。

优选地，步骤(2)中选用水平离心的方式，700～1000×g离心5-10分钟。

优选地，采血管自组装20层由阳离子层和阴离子组成的双电层。

优选地，采血管的管径为18mm。