[发明专利]一种毛细管电泳检测DNA四面体载药系统的方法有效

专利信息
申请号: 202011179201.4 申请日: 2020-10-29
公开(公告)号: CN112251488B 公开(公告)日: 2023-07-25
发明(设计)人: 洪婷婷;贾文静;郑荣会;兰敏;巢胡斐;邱琳;周舒文;崔朋飞;王程;王建浩;蒋鹏举 申请(专利权)人: 常州大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;G01N27/447;G01N21/64
代理公司: 常州市英诺创信专利代理事务所(普通合伙) 32258 代理人: 谢新萍
地址: 213164 *** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 毛细管 电泳 检测 dna 四面体 系统 方法
【权利要求书】:

1.一种毛细管电泳检测DNA四面体载药系统的方法,其特征在于,所述方法步骤如下:

步骤1:选择组成DNA四面体的DNA单链,其中,链4在5’端带有荧光染料修饰;

形成DNA四面体的四条单链序列分别为:

S1: 5’-AGG CAG TTG AGA CGA ACA TTC CTA AGT CTG AAA TTT ATC ACC CGC CATAGT AGA CGT ATC ACC-3’

S2: 5’-CTT GCT ACA CGA TTC AGA CTT AGG AAT GTT CGA CAT GCG AGG GTC CAATAC CGA CGA TTA CAG-3’

S3: 5’-GGT GAT AAA ACG TGT AGC AAG CTG TAA TCG ATT TTA ATG CCA AAG ACACTC GCT ACA TTG GCA TAA ATA ACT ACT ATG GCG-3’

S4: FAM-5’-TAA AAA CGG TAT TGG ACC CTC GCA TGA CTC AAC TGC CTG GTG ATACGA TAT TT-3’;

所述的荧光染料为FAM;

步骤2:将步骤1所述的DNA单链溶解于TM缓冲液,再将形成DNA四面体的四条单链等摩尔浓度混合在TM buffer中,在95℃下变性10 min,随后迅速降温到4℃,保持3 h,获得DNA四面体结构;

所述的四条单链混合在TM buffer中的终浓度为1 μM;

步骤3:向步骤2 所述的DNA四面体结构中加入药物,在室温、避光的条件下共孵育,得到DNA四面体-药物复合物;

所述的药物为阿霉素、二甲基姜黄素、姜黄素或紫杉醇;

所述的DNA四面体与药物的摩尔浓度比为1:20-1:250;DNA四面体结构与药物的共孵育时间为2-14 h;

步骤4:将步骤3所述的复合物用荧光毛细管电泳检测。

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