[发明专利]一种毛细管电泳检测DNA四面体载药系统的方法有效
申请号: | 202011179201.4 | 申请日: | 2020-10-29 |
公开(公告)号: | CN112251488B | 公开(公告)日: | 2023-07-25 |
发明(设计)人: | 洪婷婷;贾文静;郑荣会;兰敏;巢胡斐;邱琳;周舒文;崔朋飞;王程;王建浩;蒋鹏举 | 申请(专利权)人: | 常州大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;G01N27/447;G01N21/64 |
代理公司: | 常州市英诺创信专利代理事务所(普通合伙) 32258 | 代理人: | 谢新萍 |
地址: | 213164 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 毛细管 电泳 检测 dna 四面体 系统 方法 | ||
1.一种毛细管电泳检测DNA四面体载药系统的方法,其特征在于,所述方法步骤如下:
步骤1:选择组成DNA四面体的DNA单链,其中,链4在5’端带有荧光染料修饰;
形成DNA四面体的四条单链序列分别为:
S1: 5’-AGG CAG TTG AGA CGA ACA TTC CTA AGT CTG AAA TTT ATC ACC CGC CATAGT AGA CGT ATC ACC-3’
S2: 5’-CTT GCT ACA CGA TTC AGA CTT AGG AAT GTT CGA CAT GCG AGG GTC CAATAC CGA CGA TTA CAG-3’
S3: 5’-GGT GAT AAA ACG TGT AGC AAG CTG TAA TCG ATT TTA ATG CCA AAG ACACTC GCT ACA TTG GCA TAA ATA ACT ACT ATG GCG-3’
S4: FAM-5’-TAA AAA CGG TAT TGG ACC CTC GCA TGA CTC AAC TGC CTG GTG ATACGA TAT TT-3’;
所述的荧光染料为FAM;
步骤2:将步骤1所述的DNA单链溶解于TM缓冲液,再将形成DNA四面体的四条单链等摩尔浓度混合在TM buffer中,在95℃下变性10 min,随后迅速降温到4℃,保持3 h,获得DNA四面体结构;
所述的四条单链混合在TM buffer中的终浓度为1 μM;
步骤3:向步骤2 所述的DNA四面体结构中加入药物,在室温、避光的条件下共孵育,得到DNA四面体-药物复合物;
所述的药物为阿霉素、二甲基姜黄素、姜黄素或紫杉醇;
所述的DNA四面体与药物的摩尔浓度比为1:20-1:250;DNA四面体结构与药物的共孵育时间为2-14 h;
步骤4:将步骤3所述的复合物用荧光毛细管电泳检测。
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