[发明专利]一种新型冠状病毒2019-nCoV快检试纸条制备方法

说明书

本发明属于医学免疫检测技术领域，具体提供一种新型冠状病毒2019‑nCoV快检试纸条制备方法，其特征在于，将偶联有羧基化水溶性ZnCdSe/ZnS量子点的2019‑nCOVS1‑RBD单克隆抗体均匀喷覆于硝酸纤维素膜上，制成量子点荧光标记垫。PBS缓冲液稀释2019‑nCoV S1‑RBD多克隆抗体，均匀喷在硝酸纤维素膜上，形成检测带T。PBS缓冲液稀释羊抗鼠IgG二抗，均匀喷在硝酸纤维素膜上，形成质控带C。在粘性PVC底板上依次黏贴样品垫、量子点标记的2019‑nCOV S1‑RBD单克隆抗体的量子点标记垫、标有检测带T和质控带C的硝酸纤维素膜、吸水纸。该快检试纸条操作简单、检测快速、灵敏、特异性强、结果清晰易于判断，不需昂贵的仪器设备，适用于实验室及快检现场操作。

技术领域

本发明属于医学免疫检测技术领域，具体提供一种新型冠状病毒2019-nCoV快检试纸条制备方法。

背景技术

新型冠状病毒2019-nCoV疫情已在全世界蔓延，对我国及全球民生和经济造成极大影响。如何快速筛查诊断2019-nCoV新型冠状病毒显得极为重要，因此，其实验室检测技术备受广泛关注。

目前已涌现出多种关于新型冠状病毒2019-nCoV检测方法，如，病毒核酸检测，主要包括实时荧光定量PCR和快速多重PCR方法。但病毒核酸检测结果受到疾病发展过程、标本采集、标本保存与运输、核酸提取、扩增体系、检测操作环境以及人员操作等因素的影响，容易出现假阴性结果问题，且PCR法需要价格昂贵的PCR仪器，耗费时间长，不适于2019-nCoV的快速诊断。

因此，寻求一种价格便宜、操作简便、灵敏度和特异性都较高的检测方法是迫切需要解决的问题。

发明内容

针对上述的技术缺陷和应用时的不利情况，本发明提供了一种新冠状病毒 2019-nCoV快检试纸条制备方法，通过偶联新冠状病毒2019-nCoV S1-RBD抗体和 ZnCdSe/ZnS量子点制备量子点荧光标记物，经优化反应体系和条件，制备了一种新冠状病毒2019-nCoV快检试纸条，该试纸条操作简单、检测快速、灵敏、特异性强、结果清晰易于判断，不需昂贵的仪器设备，适用于实验室及快检现场操作。

本发明采用的技术方案如下：

步骤1：羧基化水溶性ZnCdSe/ZnS量子点与2019-nCOV S1-RBD单克隆抗体偶联；

步骤2：将步骤1获得的偶联有羧基化水溶性ZnCdSe/ZnS量子点的2019-nCOV S1-RBD 单克隆抗体均匀喷覆于经过处理的硝酸纤维素膜上，室温下晾干待用；

步骤3：PBS缓冲液稀释2019-nCoV S1-RBD多克隆抗体；

步骤4：均匀喷在硝酸纤维素膜上，形成检测带T；

步骤5：PBS缓冲液稀释羊抗鼠IgG二抗；

步骤6：将步骤5制备的稀释液均匀喷在硝酸纤维素膜上，形成质控带C，T带和C带间隔5mm-10mm；

步骤7：将步骤4和步骤6制作的含检测带T和质控带C的硝酸纤维膜垫室温下晾干待用；

步骤8：在粘性PVC底板上依次粘帖样品垫、量子点标记的2019-nCOV S1-RBD单克隆抗体的量子点标记垫、标有检测带T和质控带C的硝酸纤维素膜、吸水纸。黏贴的方法为，样品垫(1)左端对齐PVC底板(7)的左端，样品垫(1)的右端压在量子点标记垫(2)的左端，量子点标记垫(2)的右端压在标记有检测带T(5)和质控带C (6)的硝酸纤维素膜左端，吸水纸(4)压在标记有检测带T和质控带C的硝酸纤维 3膜右端。

步骤9：用试纸切刀切割成3cm-5cm试纸。

步骤10：干燥后密封保存。