[发明专利]一种检测昆虫病原线虫募集能力的装置及使用方法

权利要求书

1.一种检测昆虫病原线虫募集能力的装置，其特征在于：包括圆形透明的载玻板，所述载玻板中心上方一体连接有圆柱形的寄主固定瓶，所述寄主固定瓶底部的载玻板上标出有圆形的线虫检测区，所述载玻板边缘向上延伸有围坝，所述围坝的高度大于寄主固定瓶的高度，所述寄主固定瓶顶部的瓶口处设置有瓶盖，所述瓶盖和寄主固定瓶的侧壁上均开有筛网状小孔。

2.根据权利要求1所述检测昆虫病原线虫募集能力的装置，其特征在于：所述载波板采用圆形的透明塑料板，直径为3～12cm，厚度为1-2mm，围坝高度为1～3cm，围坝厚度与载玻板的厚度一致；寄主固定瓶底部直径小于线虫检测区的直径且为1～5cm，厚度为0.5mm，高度为0.5～2.5cm。

3.根据权利要求1所述检测昆虫病原线虫募集能力的装置，其特征在于：所述线虫检测区为圆形且位于载波板的中心，直径为2～6cm，线虫检测区设置有黑色的底层，底层上画有网格线，网格线交叉形成的正方形，其边长为1mm～2mm，网格线颜色可为红色、绿色或蓝色。

4.一种检测昆虫病原线虫募集能力的装置的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，在寄主固定瓶内放入寄主昆虫，并盖住寄主固定瓶的瓶盖；

步骤2，在烧杯内将100μL的线虫悬浮液与一定量的普朗尼克凝胶轻微搅拌，直至混合均匀；

步骤3，将配好的普朗尼克凝胶和线虫混合液加入圆形载波板内，其厚度以超过寄主固定瓶的高度而不溢出围坝为止；

步骤4，然后将装置置于温度22±1℃、相对湿度60％±10％的培养箱内，光周期为24h全暗，处理不同时间后，在体式显微镜下观察线虫检测区内寄主昆虫周边方格内的线虫数量；

步骤5，通过计算线虫运动到寄主昆虫周边方格内的吸引率的大小评价其募集能力；吸引率＝(1～2mm范围内线虫数量/培养皿内的总线虫数量)×100％；

步骤6，利用统计分析软件，分析不同线虫品系对同一寄主昆虫或同一线虫品系对不同寄主昆虫或同一线品系对同一寄主昆虫口、肛门和气孔等自然开口的吸引率。

5.根据权利要求1所述检测昆虫病原线虫募集能力的装置的使用方法，其特征在于：步骤2中普朗尼克凝胶配方试剂均为分析纯试剂，在混合均匀的凝胶分装后储存在4℃冷藏条件下备用。

6.根据权利要求1所述检测昆虫病原线虫募集能力的装置的使用方法，其特征在于：步骤4中调查线虫数量时，当线虫虫体处于网格线交叉线上时，虫体大小在网格线内大于等于一半时，即为1条线虫；当小于一半时，忽略不计。