[发明专利]用于溶酶体障碍的基因疗法

权利要求书

1.一种分离的核酸，其包含(i)包含编码抑制性核酸的转入基因的表达构建物，所述抑制性核酸包含SEQ ID NO：46-61任一者中阐述的序列；以及(ii)在所述表达构建物两侧的两个腺相关病毒反向末端重复(ITR)序列。

2.根据权利要求1所述的分离的核酸，其中所述转入基因被可操作连接到启动子。

3.根据权利要求2所述的分离的核酸，其中所述启动子是鸡β肌动蛋白(CBA)启动子。

4.根据权利要求2所述的分离的核酸，其还包含CMV增强子。

5.根据权利要求1所述的分离的核酸，其还包含土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)。

6.根据权利要求1所述的分离的核酸，其还包含牛生长激素polyA信号尾部。

7.根据权利要求1所述的分离的核酸，其中每个ITR序列是野生型AAV2 ITR序列。

8.根据权利要求1所述的分离的核酸，其中每个ITR序列包含位于所述转入基因的近端的“D”区(SEQ ID NO：14)。

9.根据权利要求1所述的分离的核酸，其中所述ITR序列中的至少一者包含相对于所述转入基因位于所述ITR序列外侧的“D”区(SEQ ID NO：14)。

10.根据权利要求1所述的分离的核酸，其中相对于所述转入基因位于5’的ITR序列包含位于所述转入基因的近端的“D”区(SEQ ID NO：14)，并且相对于所述转入基因位于3’的ITR序列包含相对于所述转入基因位于所述ITR序列外侧的“D”区(SEQ ID NO：14)。

11.根据权利要求10所述的分离的核酸，其中5’ITR的核酸序列是SEQ ID NO：71的第1-145位核苷酸，并且3’ITR的核酸序列是SEQ ID NO：71的第4018-4162位核苷酸。

12.根据权利要求11所述的分离的核酸，其还包含在所述5’ITR与所述转入基因之间的TRY区，其中所述TRY区具有SEQ ID NO：15中阐述的序列。

13.一种重组腺相关病毒(AAV)载体，其包含核酸，所述核酸包括包含编码抑制性核酸的转入基因的表达构建物，所述抑制性核酸包含SEQ ID NO：46-61任一者中阐述的序列，其中所述转入基因两侧带有两个腺相关病毒(AAV)反向末端重复序列(ITR)。

14.根据权利要求13所述的rAAV载体，其中所述转入基因被可操作连接到启动子。

15.根据权利要求14所述的rAAV载体，其中所述启动子是鸡β肌动蛋白(CBA)启动子。

16.根据权利要求14所述的rAAV载体，其还包含CMV增强子。

17.根据权利要求13所述的rAAV载体，其还包含土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)。

18.根据权利要求13所述的rAAV载体，其还包含牛生长激素polyA信号尾部。

19.根据权利要求13所述的rAAV载体，其中每个ITR序列是野生型AAV2 ITR序列。

20.根据权利要求13所述的rAAV载体，其中每个ITR序列包含位于所述转入基因的近端的“D”区(SEQ ID NO：14)。