[发明专利]基因内microRNA miR-483-3p在诱导巨噬细胞凋亡中的应用

说明书

本发明公开了基因内microRNA miR‑483‑3p在诱导巨噬细胞凋亡中的应用，诱导miR‑483‑3p上调能通过抑制靶基因MED1，使其转录调控的下游促凋亡分子p53和p21表达升高，从而促进巨噬细胞凋亡，同时，上调的主基因IGF2也能促进巨噬细胞凋亡。这些研究有助于深入理解内含子miRNA在ROS引起的巨噬细胞功能紊乱中的作用，揭示其在AS发生发展中的作用。

技术领域

本发明涉及基因内microRNA miR-483-3p在诱导巨噬细胞凋亡中的应用，属于基因工程领域。

背景技术

冠心病和脑卒中等心脑血管疾病是严重危害人类健康的“头号杀手”，动脉粥样硬化(AS)是这些疾病的关键病理基础之一。AS的发病机制十分复杂，免疫炎在其中发挥关键作用。作为关键的免疫炎症细胞，巨噬细胞从初期的脂质条纹，到末期的斑块破裂或糜烂，在AS发生发展的全过程都发挥核心作用。目前认为巨噬细胞凋亡在AS病变早期是保护因素，能减轻早期动脉粥样硬化的发展；而在AS病变晚期则加剧AS进程，导致斑块不稳定，促使坏死核心形成，增加形成血栓的风险。影响巨噬细胞凋亡的因素及其机制非常复杂包括各种环境信号、细胞因子、脂质及其衍生物等，在AS发生发展过程中巨噬细胞凋亡的机制仍未完全阐明。因此，有必要对AS中巨噬细胞的凋亡机制开展更深入的研究。

活性氧类(ROS)是需氧细胞氧化呼吸代谢的产物，包括氧离子、过氧化物和含氧自由基等。生理浓度的ROS作为信号分子，在各种细胞功能调控中发挥关键作用。如ROS能刺激破骨细胞活性，促使其分化。然而，过量ROS则引起氧化应激，导致细胞功能异常，如细胞迁移、增殖和凋亡异常等，这也是包括AS在内的多种心血管疾病的重要发病机制

内含子miRNA是位于蛋白编码基因(host gene)内含子上的一类miRNA，一般与主基因受同一启动子调控，表达模式一致，协同调控细胞功能。miR-483-3p是位于IGF2基因内含2的典型内含子miRNA，并被报道参与多种代谢性疾病和肿瘤的发生发展。如在鼠源3T3-L1细胞系中过表达miR-483-3p能通过限制脂肪细胞的脂质存储而引发脂毒性和胰岛素抵抗；抑制miR-483-3p则能促进内皮祖细胞归巢。miR-483-3p在肾母细胞瘤、结肠癌、肝癌等中过表达，能抑制肿瘤细胞凋亡，促进肿瘤发生。但也有研究显示miR-483-3p促进肿瘤细胞凋亡，抑制增殖，从而抑制肿瘤发病。此外，miR-483-3p在人小梁网细胞中能抑制靶基因Smad4表达，从而对抗氧化应激对细胞外基质的上调。这些结果提示miR-483-3p的功能复杂，在不同种类的细胞和环境因素下的作用可能不同甚至相反。目前仍未有miR-483-3p在氧化应激诱导巨噬细胞凋亡中作用和机制的报道。

发明内容

本发明为解决上述内容，提供基因内microRNA miR-483-3p在诱导巨噬细胞凋亡中的应用，诱导miR-483-3p上调能通过抑制靶基因MED1，使其转录调控的下游促凋亡分子p53和p21表达升高，从而促进巨噬细胞凋亡，同时，上调的主基因IGF2也能促进巨噬细胞凋亡。

基因内microRNA miR-483-3p在诱导巨噬细胞凋亡中的应用。

进一步的，上述基因内microRNA miR-483-3p的序列为SEQ ID NO.1。

基因内microRNA miR-483-3p诱导巨噬细胞凋亡的方法，包括如下步骤：上调巨噬细胞内基因内microRNA miR-483-3p的表达，从而抑制其靶基因MED1表达，进而上调MED1调控的p53/p21促进ROS诱导的巨噬细胞凋亡。

本申请还可以提供基因内microRNA miR-483-3p在缓解高浓度H₂O₂引起的氧化应激中的应用。

进一步的，上述应用的应用方法为：下调基因内microRNA miR-483-3p在巨噬细胞中的表达。

有益效果：