[发明专利]一种酸酶法获得小球藻蛋白肽的工业生产方法

说明书

一种酸酶法获得小球藻蛋白肽的工业生产方法，包括下述步骤：（1）将小球藻粉进行溶胀处理，得到小球藻料液；（2）酸水解：向步骤（1）溶胀后得到的小球藻料液加入盐酸进行水解；（3）酶解：将经过酸水解的小球藻料液的pH值调节至7‑9，然后在45‑60℃温度下，依次加入纤维素酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶，酶解4‑8小时，灭酶后滤除酶解液中的藻渣，得到上清液；（4）对上清液进行脱色处理，得到脱色液；（5）对步骤（4）得到的脱色液进行过滤后，得到小球藻蛋白肽溶液，小球藻蛋白肽溶液经喷雾干燥获得小球藻蛋白肽。本发明结合酸水解和生物酶水解，优势互补，能够提高小球藻的酶解效率和蛋白肽提取率。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种酸酶法获得小球藻蛋白肽的工业生产方法。

背景技术

小球藻（Chlorella spp.）是一类单细胞绿藻，被称之为“药物藻类”。小球藻细胞形态呈卵形或椭圆形，直径在两微米到十二微米之间，易于培养，生态分布广，生长速度快，是优质的单细胞蛋白源，其蛋白质含量高达 50-65%，可作为高蛋白食品为人体迅速补充营养恢复体能。小球藻的氨基酸组成高于世界卫生组织（WHO）和联合国粮农组织（FAO）颁布的用于人类营养的蛋白质标准，因此被 FAO 列为 21 世纪人类的健康食品。我国卫生部在2012 年批准蛋白核小球藻为新资源食品。小球藻蛋白具有抗氧化作用，可清除体内自由基；小球藻中的多种蛋白质具有抗肿瘤和免疫调节作用；小球藻蛋白具有解毒保肝、降压等作用，在保健食品和医药具有广阔的应用前景，备受大家关注。

小球藻干粉溶解性差、藻腥味浓重，细胞壁厚且坚韧，蛋白消化吸收差，而小球藻选择合适的条件进行水解获得的小分子肽不但大大提高溶解性，改善了口感，更重要的是获得了抗氧化活性肽、抗肿瘤活性肽、免疫增强活性肽、增强活力活性肽等功能肽，同时小分子肽可被直接快速吸收，提高了消化吸收利用率。

目前水解蛋白获得蛋白肽的方法主要有酸水解、碱水解、生物酶酶水解。

酸水解法是利用酸在一定度条件下水解蛋白获得蛋白肽的方法。酸水解成本低、产物几乎不被消旋，但水解过度易破坏色氨酸、天冬酰胺和谷氨酰胺等敏感氨基酸，甚至会破坏小分子肽。

碱水解法是利用碱在一定度条件下水解蛋白获得蛋白肽的方法。碱水解法水解蛋白质色氨酸稳定，但丝氨酸和苏氨酸尤其胱氨酸和半胱氨酸易损失，并且水解后氨基酸会消旋，使L型氨基酸变成D型氨基酸，水解率低。

酶水解法是利用生物酶在一定度条件下水解蛋白获得蛋白肽的方法，酶水解法水解位点特定，可以有选择的水解某些特定的氨基酸肽键，安全性高、反应条件温和、副反应少、不破坏敏感氨基酸、水解产物在营养、风味、工艺等方面均优于酸、碱水解。

目前关于小球藻活性肽的实验室研究较多，但是关于小球藻活性肽的工业化利用较少。目前小球藻的产业研究主要集中在单酶或复合酶一次水解（例如公布号为CN102851345A的中国发明专利申请说明书所公开的小球藻抗肿瘤多肽的制备方法，公布号为CN104120160A的中国发明专利申请说明书所公开的一种小球藻抗氧化肽的制备方法），或用一种酶水解一段时间后加入第二种酶（例如公布号为CN 109402204 A 的中国发明专利申请说明书所公开的一种小球藻免疫活性肽的制备方法，公布号为CN 109207544 A的中国发明专利申请说明书所公开的一种小球藻抗氧化多肽的制备方法），但由于小球藻细胞壁厚且富含纤维素，溶胀、均质等前处理破壁率较低，因此生物酶解效果较差，蛋白肽提取率较低。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种酸酶法获得小球藻蛋白肽的工业生产方法，采用这种方法能够提高小球藻的酶解效率和蛋白肽提取率。采用的技术方案如下：

一种酸酶法获得小球藻蛋白肽的工业生产方法，其特征在于包括下述步骤：

（1）将小球藻粉进行溶胀处理，得到小球藻料液；