[发明专利]一种牙髓间充质干细胞冻存液及冻存方法有效
申请号: | 202011198474.3 | 申请日: | 2020-10-31 |
公开(公告)号: | CN112167246B | 公开(公告)日: | 2021-07-27 |
发明(设计)人: | 杨莹 | 申请(专利权)人: | 北京泰盛生物科技有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 广州海藻专利代理事务所(普通合伙) 44386 | 代理人: | 张大保 |
地址: | 102200 北京市昌平区科技园区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 牙髓 间充质 干细胞 冻存液 方法 | ||
1.一种牙髓间充质干细胞冻存液,其特征在于,由组分A和组分B组成,所述组分A为无血清培养基,所述组分B由以下原料组成:钛酸纳米管、5-磷酸腺苷二钠、维生素E、1,8-桉叶素、甘油;
所述组分B中的各原料在冻存液中的浓度为:钛酸纳米管6.5-9.2μg/mL、5-磷酸腺苷二钠7.8-8.5μg/mL、维生素E1.5-4.5μg/mL、1,8-桉叶素10.2-14.5mg/mL、甘油25-30mg/mL;
所述无血清培养基为DMEM/F12培养基。
2.根据权利要求1所述牙髓间充质干细胞冻存液,其特征在于,所述钛酸纳米管的直径为4-10nm,长度为100-500nm,比表面积为200-300m2/g。
3.一种牙髓间充质干细胞的冻存方法,其特征在于,采用权利要求1至2中任一项所述的冻存液冻存。
4.根据权利要求3所述牙髓间充质干细胞的冻存方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将待冻存的牙髓间充质干细胞采用组分A的无血清培养基重悬,吹打均匀,降温至4-6℃;
(2)向步骤(1)的混合物中加入组分B,放入-80℃的冷冻环境中,24h后转移至液氮中保存,即完成。
5.根据权利要求3所述牙髓间充质干细胞的冻存方法,其特征在于,步骤(1)中重悬后细胞密度为2-4×106个/mL。
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