[发明专利]竹柏果实饼粕乙酸乙酯有效部位的提取方法和用途

说明书

本发明提供了一种竹柏果实饼粕中得到乙酸乙酯有效部位的提取方法和用途。该有效部位是从竹柏果实提炼过油的饼粕中通过采用醇/水溶液提取后经过正己烷、二氯甲烷洗涤后得到乙酸乙酯有效部位，进一步实验研究发现该有效部位具有治疗肿瘤/癌症疾病的潜在功效。

技术领域

本发明属于医药技术领域。具体涉及从竹柏果实提炼油后的饼粕中获得的乙酸乙酯有效部位的提取方法及用途。

背景技术

竹柏(Podocarpus nagi)，罗汉松科(Podocarpaceae)罗汉松属(Podocarpus)植物，在民间则有山杉、糖鸡子、罗汉柴、铁甲树、椰树等别名。主要分布于长江以南地带，如福建、江西、浙江、湖南、广西、广东等地。在瑶族民间，竹柏作为习用药材，具有止血、接骨、消肿作用；也可治外伤、出血、骨折、狐臭、眼疾、感冒等；竹柏鲜树皮或根的水煎剂可用于治风湿性关节炎([1]国家中医药管理局《中华本草》编委会，中华本草[M]，第2册第4卷，上海:上海科学技术出版社，1999.0813-0817；[2]戴斌，中国现代瑶药[M]，南宁:广西科学技术出版社，2009:257-259.16-18])。

竹柏虽然是瑶族民间习用药材，但是到目前为止还没有完全研究清楚其有效药用成分及活性物质基础。而且对竹柏化学成分及药理活性方面的研究相对较少。因此用科学的方法深入研究分析竹柏的天然药用成份及物质基础，将为竹柏的成药性研究提供相应的科学依据。

近年来，我们研究小组对竹柏进行了相关的研究：对竹柏叶、果实进行了提取分离。从竹柏果实中提取了可食用、具有抗氧化活性、降血压活性的功能养生油(雍建平、卢灿忠、张世碧，一种竹柏籽油的制备方法及用途，申请号：202010203003.0)。

癌症已成为世界范围内最主要的致死性疾病。癌症可于任何年龄在各种器官及组织中发生，导致死亡的主要癌症种类有：肺癌、胃癌、肝癌、结肠癌和乳腺癌等。虽然部分小分子抗癌药物已用于临床，部分化合物正在进行临床前的研究。然而大部分癌症患者发觉病情时已是中期至晚期，临床治疗总体效果较差，尤其是多药耐药性的不断出现，使得癌症的治疗困难重重。因此，开发出活性高、副作用低的新型抗癌药物来满足临床的需求迫在眉睫。中药在我国用药历史悠久，毒副作用相对较低。从中药中发现新的候选药物或先导药物是当今药物研发的主流，尤其是对民族中药的深入开发。

文献报道了竹柏果皮和果壳中挥发油成分具有抗肿瘤活性(廖泽勇、韦玮，竹柏果皮和果壳中挥发油成分及其抗肿瘤活性研究[J]，医药导报，2015,34(5):609-612)。鉴于此，我们接着对竹柏果实提炼油后的饼粕进行研究，以期发现具有抗肿瘤活性的有效部位或成份。

发明内容

本发明的目的是针对临床上应用的抗肿瘤/癌症药物具有毒、副作用大的现状，提供了从瑶族习用药材竹柏果实提炼油后的饼粕中获得了具有抗肿瘤活性的有效部位，该部位具有治疗肿瘤/癌症的潜在功效。

本发明提供了一种竹柏果实提炼油后的饼粕中乙酸乙酯有效部位的提取方法，包括以下步骤：

A、将竹柏果实提炼过油的饼粕用乙醇和水的混合溶液浸泡或热提取后，过滤，浓缩，得到浸膏；

B、将步骤A所述浸膏分散在水中，用正己烷萃取，得到第一水层；

C、将步骤B中所述第一水层用二氯甲烷萃取，得到第二水层；

D、将步骤C中所述第二水层用乙酸乙酯萃取，收集合并乙酸乙酯层，浓缩、干燥后得到所述有效部位。

根据本发明的实施方案，步骤A中所述竹柏果实提炼过油的饼粕与混合溶液的质量体积比(kg/L)可以为1:(1-5)，例如为20:50；

根据本发明的实施方案，步骤A中所述乙醇和水的体积比可以为(50-100):30，例如70:30；