[发明专利]手性1，3-二羟基-1-芳基丙酮化合物的合成方法

权利要求书

1.一种生物催化合成手性1，3-二羟基-1-取代芳基丙酮的方法，其特征在于，利用丙酮酸脱羧酶催化羟基丙酮酸与不同取代基的苯甲醛反应得到手性1，3-二羟基-1-取代芳基丙酮；具体包括如下步骤：

a)将丙酮酸脱羧酶基因工程菌在LB培养基中进行扩增培养，诱导表达产生目的蛋白之后，离心收集菌体；所述的丙酮酸脱羧酶基因工程菌由氨基酸序列为SEQ ID NO：1的丙酮酸脱羧酶，进行基因合成得到相应的基因并构建到质粒载体，将质粒转入工程菌中得到；

b)将收集到的菌体用缓冲液重悬，加入一定量的羟基丙酮酸、转酮醇酶ThDP以及不同取代基的苯甲醛，在适当条件下反应一定时间；

c)反应一定时间之后，将反应体系离心去除蛋白，上清液用有机溶剂多次萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，通过硅胶柱纯化得到目标产物。

2.如权利要求1所述的生物催化合成手性1，3-二羟基-1-取代芳基丙酮的方法，其特征在于，步骤b)中不同取代基的苯甲醛为苯甲醛，4-氟苯甲醛，4-甲硫基苯甲醛，4-溴苯甲醛，4-氯苯甲醛，4-甲基苯甲醛，3-氯苯甲醛，3-氟苯甲醛或者3-甲基苯甲醛中的一种。

3.如权利要求1所述的生物催化合成手性1，3-二羟基-1-取代芳基丙酮的方法，特征在于，步骤b)中，所述的羟基丙酮酸由D-氨基酸氧化酶转化D-丝氨酸获得。

4.如权利要求3所述的生物催化合成手性1，3-二羟基-1-取代芳基丙酮的方法，特征在于，步骤b)中，所述的羟基丙酮酸由D-氨基酸氧化酶转化D-丝氨酸获得并且不经分离直接作为底物反应。

5.如权利要求3或者4所述的生物催化合成手性1，3-二羟基-1-取代芳基丙酮的方法，特征在于，步骤b)中，所述的D-氨基酸氧化酶的氨基酸序列为SEQ ID NO：2。