[发明专利]CRYAB在急性肾损伤检测中的应用及检测试剂盒

说明书

本发明公开了CRYAB在急性肾损伤检测中的应用及检测试剂盒，αB‑晶状体蛋白可作为检测标志物用于急性肾损伤检测，针对该发现，制作了相应的检测试剂盒。本发明有助于解决现存于医药领域中的问题，即不能在早期阶段检测急性肾损伤的严重性，从而及时以有效疗法来治疗患者。

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及αB晶状体蛋白在检测缺血再灌注肾损伤及程度的用途。

背景技术

急性肾损伤(Acute kidney injury,AKI)是由于不同原因引起的临床常见、发病率和死亡率极高的肾脏疾病。中国每年AKI发病达400-600万，相关死亡30-50万。目前对AKI只有透析等辅助治疗手段，没有有效的早期诊断方法和治疗药物。急性肾损伤最早出现在近端肾小管上皮细胞，并表现为各种形式的细胞死亡。迄今尚无有效治疗急性肾损伤的药物，临床治疗手段多采用支持治疗，因此早期诊断和早期治疗是最好的防治急性肾损伤的策略。

目前可用于早期检测AKI的工具缺乏敏感性和特异性，因此，寻找早期生物标志物越来越受到重视。而且，这些新的生物标志物可能是用于早期检测AKI的潜在工具，并且也可以用于区分不同程度的肾损伤，从而确定检测由于严重的AKI发作而有风险发展慢性肾疾病的患者。因此，开发有效的生物标志物将有助于对损伤进行分级，并且检测具有慢性肾疾病发展风险的那些患者。

在临床实践中，AKI诊断的确定是基于血清肌酐的升高并且通过评估肾小球滤过率(GFR)进行。尽管血清肌酐用于在慢性肾疾病患者中、在AKI患者中进行肾功能评估，但是因为以下三点原因它并不是一个好的指示剂：1)大量肾组织可能被损伤，但不伴随血清肌酐升高，在肾移植供体中存在明显的实例，其失去50％的肾实质，并且在血清肌酐水平中并不存在任何变化；2)血清肌酐浓度取决于许多非肾因素，如被体重、人种、性别、年龄、药物消耗、肌肉代谢和蛋白摄取影响，血清肌酐的升高以滞后形式发生。关于GFR测定，这可能由于肾和非肾损伤而被改变，例如，血容量不足或在传入小动脉中血管收缩或血管舒张程度的改变，这与肾损伤并不相关。所有这些因素使发展AKI的患者的早期干预难以进行，并且后果是不能达到更好的预后。

生物标志物是一种生物分子，其内源性产生并且可能是用于检测异常生物学过程的客观指示物。此外，其可以有助于检测药理干预是否可用于减少由病理过程导致的损伤。目前研究虽然提出了多种用于急性肾损伤检测的蛋白和生物化学标志物，然而仅用一种生物标志物难以同时提高诊断的敏感性和特异性，有必要组合运用它们或继续寻找新型的具有早期诊断的潜力并且用于AKI损伤分级的生物标志物。

据报道，急性肾损伤可以激活热休克反应，其中之一是热休克蛋白家族(Hsp)表达的增加，其有助于恢复细胞稳态。αB-晶状体蛋白(αB-crystallin,CRYAB)属于小分子热休克蛋白家族，即分子量在12-34kD中间，具有分子伴侣作用。具体而言，α晶状体蛋白家族包括αA和αB晶状体蛋白，αA晶状体蛋白主要存在于晶状体，在胸腺和脾脏有少量表达。αB晶状体蛋白在多种器官、组织、细胞中表达，在发挥应激反应中发挥重要作用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题为：如何解决现有技术中不能早期检测AKI和不能对肾脏遭受的肾损伤的程度进行分级的问题。

本发明的技术方案为：αB-晶状体蛋白作为检测标志物在制备用于急性肾损伤检测试剂盒中的应用，αB-晶状体蛋白的氨基酸序列如下：MDIAIHHPWIRRPFFPFHSPSRLFDQFFGEHLLESDLFPTSTSLSPFYLRPPSFLRAPSWFDTGLSEMRLEKDRFSVNLDVKHFSPEELKVKVLGDVIEVHGKHEERQDEHGFISREFHRKYRIPADVDPLTITSSLSSDGVLTVNGPRKQVSGPERTIPITREEKPAVTAAPKK(SEQ IDNo.1)。

进一步地，本发明还提供了一种检测急性肾损伤标志物的试剂盒，含有抗αB-晶状体蛋白的抗体，所述αB-晶状体蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。