[发明专利]一种裙带菜抗肿瘤小分子肽及其制备方法和应用在审
申请号: | 202011209544.0 | 申请日: | 2020-11-03 |
公开(公告)号: | CN112301082A | 公开(公告)日: | 2021-02-02 |
发明(设计)人: | 于慧;刘海梅;赵芹;吴红艳 | 申请(专利权)人: | 鲁东大学 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/34;A23L33/18 |
代理公司: | 北京中济纬天专利代理有限公司 11429 | 代理人: | 潘剑敏 |
地址: | 264025 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 裙带菜 肿瘤 分子 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种裙带菜抗肿瘤小分子肽的制备方法,其特征在于,步骤如下:
(1)挑选裙带菜清水浸泡,漂洗干净后切成适当的长度,在20~40℃下进行低温干燥,经粗粉碎后采用超声波粉碎机粉碎至颗粒粒度为4μm以下;
(2)向步骤(1)获得的裙带菜粉末中加入其质量25~100倍的超纯水,搅拌均匀后使用0.01~0.2mol/L的HCl和NaOH来调节反应体系的pH值至1~2,加入胃蛋白酶,在控制条件下进行酶解,酶解完成后再采用相同方法调节pH值至7~9;加入胰蛋白酶在控制条件下进行酶解;
(3)酶解结束后,向步骤(2)的酶解液中加入乙醇至体系乙醇体积分数为40~60%,静置12~24h,离心取上清液。
(4)将步骤(3)得到的上清液,经减压浓缩后,采用分子量为3KD的超滤膜超滤,截留分子量大小为3KD以下的酶解液,然后采用纳滤进行脱盐处理;
(5)将步骤(4)得到的溶液进行冷冻干燥,即可获得分子量大小为3KD以下的裙带菜抗肿瘤小分子肽。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中的裙带菜可为裙带菜的叶、梗、孢子叶及其提糖后的副产物。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤步骤(2)中加入胰蛋白酶进行酶解之后,采用相同方法调节pH值至6~8,加入复合蛋白酶在控制条件下进行酶解。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤步骤(2)胃蛋白酶的酶解条件为:体系pH值调至1~2,1:15000U/mg胃蛋白酶的添加量为3~8%(w/w),酶解温度为37℃,酶解时间为1~4h;
胰蛋白酶的酶解条件为:体系pH值调至7~9,1:250U/mg胰蛋白酶的添加量为1~6%(w/w),酶解温度为37℃,酶解时间为1~4h。
5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述复合蛋白酶的酶解条件为:体系pH值调至6~8,1.5AU/g复合蛋白酶的添加量为0.005~0.4%(w/w),酶解温度为40~60℃,酶解时间为1~8h。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)所述的离心条件为5000~12000r/min,离心15~40min。
7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(4)所述纳滤为0.15KD、0.2KD和0.25KD的纳滤膜。
8.一种裙带菜抗肿瘤小分子肽,其特征在于,采用如权利要求1-7所述的制备方法制备得到。
9.一种裙带菜抗肿瘤小分子肽在制备抗肿瘤食品或食品组合物中的应用。
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