[发明专利]一种新型冠状病毒抗原胶体金快速诊断试剂盒及其制备方法

说明书

本申请涉及一种新型冠状病毒抗原胶体金快速诊断试剂盒及其制备方法。本申请涉及一种制备胶体金检测试剂的方法及由此制备的胶体金检测试剂。本申请还涉及一种制备抗体标记的胶体金检测试剂的方法。本申请还涉及一种用于检测新型冠状病毒的诊断试剂盒，其包含本申请方法制备的胶体金检测试剂，或者由本申请方法制备的抗体标记的胶体金检测试剂。

技术领域

本发明涉及病原体检测领域。具体而言，本申请涉及一种新型冠 状病毒抗原胶体金快速诊断试剂盒及其制备方法。本申请涉及一种制 备胶体金检测试剂的方法及由此制备的胶体金检测试剂。本申请还涉 及一种制备抗体标记的胶体金检测试剂的方法。本申请还涉及一种用 于检测新型冠状病毒的诊断试剂盒，其包含本申请方法制备的胶体金 检测试剂，或者由本申请方法制备的抗体标记的胶体金检测试剂。

背景技术

由新型冠状病毒(2019-nCoV)引起的非典型肺炎病例，重症患者多在发病 一周后出现呼吸困难，严重者快速进展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难 以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能障碍等。因此对于疾病的预防和早期诊断对 于控制新型冠状病毒疫情蔓延尤为重要。

目前已经公布的几个新冠抗原检测试剂盒，主要是针对新型冠状 病毒NP抗原进行检测。由于NP抗原属于核蛋白，隐藏于病毒内部， 检出困难，影响了试剂盒的检出率。

为了提高新型冠状病毒的早期诊断效率，本发明公开一种新型冠 状病毒混合抗原(NP及S1)胶体金快速诊断试剂盒，同时检测新型 冠状病毒NP抗原，以及膜蛋白S1抗原。由于膜蛋白S1位于病毒表 面，因此大大提高了试剂盒的检出率和灵敏度，该试剂盒操作简单， 能够快速诊断出患者是否感染SARS-CoV-2，利于疫情的有效控制。 然而，针对S1抗原的抗体制备非常困难，目前以S1抗原为主体的疫 苗无法产生抗体。

舒文祥等(胶体金免疫层析法快速检测赭曲霉素A研究，粮食与 油脂，2011年第10期20-22页)公开了一种制备胶体金检测试剂的 方法，获得的胶体金用抗-赭曲霉素A抗体进行标记从而用于检测。 在现有技术中，少量柠檬酸三钠加入到大量氯金酸中，需要很长时间 柠檬酸三纳才能分散均一，其间反应器中将出现浓度明显高低不等的 小区域，这种情况将使得反应速率不一，进而导致晶核形成速度不一， 因此，胶体金的质量就差。

需要一种胶体金试剂的制备方法提供更均一、稳定且质量更好的 胶体金。还需要提供一种用于制备新型冠状病毒抗原标记的胶体金的 方法，其能够以高度准确率检测出患者是否感染SARS-CoV-2。特别 地，需要制备出针对S1抗原和NP抗原，特别是S1抗原的胶体金检 测试剂。

发明内容

本发明与现有技术相比，具有如下的优点和有益效果.

本发明为一种新型冠状病毒抗原胶体金快速诊断试剂盒，能同时 检测新型冠状病毒核蛋白NP抗原，以及膜蛋白S1抗原。S1抗原是 新型冠状病毒的表面结构蛋白，针对S1抗原的单克隆抗体，比较目 前的核蛋白NP抗原的单克隆抗体，具有检测灵敏，不需要充分裂解 病毒颗粒就能轻松捕获病毒表面S1抗原的优势。而同时该试剂盒又 具备了NP抗原检测试剂盒的特异性优势。该试剂盒操作简单，能够 快速诊断出患者是否感染SARS-CoV-2，利于疫情的有效控制。

此外，本申请工艺进一步优化了胶体金反应条件，生产的金颗粒 稳定、均一、批间差小。另外，要实现高产率，就要提高反应物浓度。 但是反应物浓度过高，往往可能出现目标产物产率不够而副产物大量 产生的现象。反应物浓度不够会使得金颗粒大小不对或形状不规则， 本申请采用的金颗粒制备方法中反应物浓度为最优化，制备出的金颗 粒稳定、均一，胶体一旦形成，无论再延长反应时间，金的粒径都不 再变化。