[发明专利]一种苓桂术甘汤和甘姜苓术汤特征图谱构建方法及其鉴别方法有效

专利信息
申请号: 202011213555.6 申请日: 2020-11-04
公开(公告)号: CN114441662B 公开(公告)日: 2023-09-08
发明(设计)人: 周厚成;胡昌江;姜艳娇;黄宇;仰莲;沈东;陈中华;孙纪元 申请(专利权)人: 四川新绿色药业科技发展有限公司
主分类号: G01N30/02 分类号: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/34;G01N30/86
代理公司: 成都天嘉专利事务所(普通合伙) 51211 代理人: 赵丽
地址: 611930 四川省*** 国省代码: 四川;51
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摘要:
搜索关键词: 一种 苓桂术甘汤 甘姜苓术汤 特征 图谱 构建 方法 及其 鉴别方法
【权利要求书】:

1.一种苓桂术甘汤和甘姜苓术汤特征图谱构建方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)、供试品溶液制备:分别制备苓桂术甘汤的供试品溶液和甘姜苓术汤的供试品溶液;

(2)、对照品溶液制备:取甘草苷、甘草酸铵、肉桂酸、桂皮醛和原儿茶酸对照品,加甲醇定容,得对照品溶液;

(3)、高效液相色谱条件:液相色谱柱:C18色谱柱;

柱温:30℃;

检测波长:270nm;

流速:1.0mL/min;

进料量:10μL;

流动相A为乙腈,流动相B为0.1磷酸,梯度脱洗,梯度脱洗过程为:

0~12min,流动相A为3~20%,流动相B为97~80%,

12~36min,流动相A为20~30%,流动相B为80~70%,

36~45min,流动相A为30~60%,流动相B为70~40%,

45~60min,流动相A为60~85%,流动相B为40~15%;

(4)、高效液相色谱检测:将步骤(1)制得的供试品溶液和步骤(2)制得的对照品溶液分别进行高效液相色谱检测,得到对应的特征图谱。

2.根据权利要求1所述的一种苓桂术甘汤和甘姜苓术汤特征图谱构建方法,其特征在于:所述步骤(1)中制备苓桂术甘汤的供试品溶液,包括以下步骤:

(1)、称取茯苓55g、桂枝41g、白术27g、炙甘草27g,加水2升,提取60分钟,提取1次,200目筛网过滤,收集药液,采用真空冷冻干燥机冻干,得到苓桂术甘汤冻干粉;

(2)、精密称取苓桂术甘汤冻干粉0.5g,加入70%甲醇20ml,超声处理30min,放冷至室温,摇匀,滤过,即得苓桂术甘汤供试品溶液。

3.根据权利要求1所述的一种苓桂术甘汤和甘姜苓术汤特征图谱构建方法,其特征在于:所述步骤(1)中制备甘姜苓术汤的供试品溶液,包括以下步骤:

(1)、称取茯苓55g、干姜55g、白术27g、炙甘草27g,加水2升,提取60分钟,提取1次,200目筛网过滤,收集药液,采用真空冷冻干燥机冻干,得到甘姜苓术汤冻干粉;

(2)、精密称取甘姜苓术汤冻干粉0.5g,加入70%甲醇20ml,超声处理30min,放冷至室温,摇匀,滤过,即得甘姜苓术汤供试品溶液。

4.根据权利要求2或3所述的一种苓桂术甘汤和甘姜苓术汤特征图谱构建方法,其特征在于:所述真空冷冻干燥机冻干程序包括预冻、升华干燥和解析干燥。

5.根据权利要求1所述的一种苓桂术甘汤和甘姜苓术汤特征图谱构建方法,其特征在于:所述步骤(2)混合对照品溶液制备方法为:分别精密称定甘草苷、甘草酸铵、肉桂酸、桂皮醛、原儿茶酸对照品,置于容量瓶中,加甲醇溶解,摇匀,制得每1ml甲醇溶液中各含50μg的对照品溶液。

6.一种苓桂术甘汤和甘姜苓术汤鉴别方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)、测定苓桂术甘汤和甘姜苓术汤的特征图谱;

(2)、将待测汤剂测定特征图谱;取苓桂术甘汤和甘姜苓术汤,按权利要求1中步骤(1)供试品溶液的制备方法,分别制备苓桂术甘汤和甘姜苓术汤的样品溶液;将制得的样品溶液,按权利要求1中步骤(3)的检测条件,分别进行高效液相色谱检测,即得对应的待测汤剂的特征图谱;

(3)、将待测汤剂特征图谱与苓桂术甘汤和甘姜苓术汤的特征图谱相比对。

7.根据权利要求6所述的一种苓桂术甘汤和甘姜苓术汤鉴别方法,其特征在于:所述苓桂术甘汤的特征图谱共有17个特征峰,与甘草苷参照物相应的峰为S峰,计算各特征峰与S峰的相对保留时间,其相对保留时间应在规定值的±10%之内,各峰规定值依次为:0.225、0.296、0.390、0.471、0.567、0.724、0.972、1.000、1.216、1.561、1.682、1.842、2.113、2.207、2.260、2.464、2.603。

8.根据权利要求6所述的一种苓桂术甘汤和甘姜苓术汤鉴别方法,其特征在于:所述甘姜苓术汤的特征图谱共有15个特征峰,与桂皮酸参照物相应的峰为S峰,计算各特征峰与S峰的相对保留时间,其相对保留时间应在规定值的±10%之内,各峰规定值依次为:0.224、0.297、0.391、0.470、0.627、0.722、0.972、1.000、1.216、1.560、2.189、2.241、2.314、2.444、2.580。

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