[发明专利]一种油短波单胞菌菌株及其应用

说明书

本发明公开一种油短波单胞菌(Brevundimonas olei)菌株及其应用，该菌株为一种大丽轮枝菌内共生菌，其保藏号为CCTCC NO：M 2020392。采用形态学鉴定、多样性测序分析确定该菌株为Brevundimonas olei，通过共培养实验探究B.olei发酵液对大丽轮枝菌生长及微菌核的影响。扫描电镜观察，随培养时间及发酵液浓度增加大丽轮枝菌分生孢子形成减少，菌丝形态发生膨胀、破裂、异型，微菌核逐渐减少消失，该研究证明共生B.olei对大丽轮枝菌有较好抑菌活性。

技术领域

本发明涉及微生物种质资源的开发与利用技术领域。具体地说是一种油短波单胞菌菌株及其应用。

背景技术

微生物与其他个体之间存在着复杂的共生关系，这种共生现象广泛存在于微生物与微生物之间，微生物与植物、微生物与动物。共生菌是自然界中存在的普遍现象，且共生菌宿主类型多样，能与不同动物、植物、珊瑚、大型真菌、蚜虫、藻类等寄主共生，参与或者决定宿主某些特性。共生菌能为植物固氮、能为植物提供营养、能参与宿主次生代谢的合成、能协助宿主适应极端环境，共生菌分泌多种活性物质促进或破坏宿主生长，改变宿主的表型和代谢。

据相关文献报道，病原菌内共生菌与病原菌致毒致病性有一定关联，尤其是水稻立枯病的病原菌根霉菌，其毒素的产生是由其内共生菌-伯克霍尔德菌产生而导致水稻病害发生，Fusarium对尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)的拮抗作用不是其本身，而是Fusarium的共生体。

棉花黄萎病主要是由大丽轮枝菌引起的土传真菌维管束病害，严重影响连作棉田产量及棉花品质，制约了棉花产业健康持续发展，由大丽轮枝菌引起的棉花黄萎病是否存在此类共生关系未见相关报道。

发明内容

为此，本发明所要解决的技术问题在于提供一种油短波单胞菌菌株及其应用。

为解决上述技术问题，本发明提供如下技术方案：

一种油短波单胞菌(Brevundimonas olei)菌株，该菌株为一种大丽轮枝菌内共生菌，其保藏号为CCTCC NO：M 2020392。

一种微生物制剂，含权利要求1所述的油短波单胞菌菌株的无菌培养液。

上述微生物制剂，将所述油短波单胞菌菌株接种于LB培养基中，37℃，180r·min^-1，培养16-24h，6000r·min^-1离心10min，取上清液，0.22μm微孔滤膜过滤除菌2-3次，分装，置于4℃冰箱保存备用，得到微生物制剂。

上述微生物制剂，所述油短波单胞菌菌株加入LB培养基后，该油短波单胞菌菌株的质量浓度为10％-50％。

上述油短波单胞菌菌株在防治植物真菌病害中的应用，所述真菌为大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)。

上述油短波单胞菌菌株在防治棉花黄萎病上的应用。

本发明的技术方案取得了如下有益的技术效果：

采集南疆棉区发病棉田黄萎病株，从中分离大丽轮枝菌，通过破壁分离，从大丽轮枝菌中分离出一株内共生菌，鉴定为油短波单胞菌(Brevundimonas olei)菌株，油短波单胞菌菌株的存在是否对大丽轮枝菌的繁殖体和致病性产生影响，是本发明研究的主要目的。

采用形态学鉴定、多样性测序分析确定该菌株为Brevundimonas olei。

离体实验：取B.olei菌液及无菌发酵液通过共培养方式探究该菌株对大丽轮枝菌形态及抑菌率影响，研究发现不同浓度B.olei菌液、发酵液均对大丽轮枝菌产生抑制作用。共培养15d，50％浓度的B.olei菌液可以完全抑制微菌核产生，使得大丽轮枝菌由原来菌核型转变为菌丝型，其发酵液抑菌率最高达到61.30±0.54％。