[发明专利]一种人运动神经元基因拷贝数相对定量检测方法及试剂盒

权利要求书

1.一种人运动神经元基因拷贝数相对定量检测试剂盒，含有单链DNA组A和/或单链DNA组B：

所述单链DNA组A由引物对A、探针A1和探针A2组成；

所述引物对A为特异性检测SMN1基因和SMN2基因第7外显子的共用引物，由SEQ IDNo.1所示的上游引物SMN-EX7-F和SEQ ID No.2所示的下游引物SMN-EX7-R组成；

所述探针A1为检测SMN1基因第7外显子的探针SMN1-EX7-P，其核苷酸序列如SEQ IDNo.5所示；

所述探针A2为检测SMN2基因第7外显子的探针SMN2-EX7-P，其核苷酸序列如SEQ IDNo.6所示；

所述单链DNA组B由引物对B、探针B1和探针B2组成；

所述引物对B为特异性检测SMN1基因和SMN2基因第8外显子的共用引物，由SEQ IDNo.3所示的上游引物SMN-EX8-F和SEQ ID No.4所示的下游引物SMN-EX8-R组成；

所述探针B1为检测SMN1基因第8外显子的探针SMN1-EX8-P，其核苷酸序列如SEQ IDNo.7所示；

所述探针B2为检测SMN2基因第8外显子的探针SMN2-EX8-P，其核苷酸序列如SEQ IDNo.8所示。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还含有单链DNA组C；所述单链DNA组C由引物对C和探针C组成；

所述引物对C为特异性检测内参基因的引物对；

所述探针C为检测所述内参基因的探针。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述引物对C为检测内参基因PRR30的引物对，由SEQ ID No.9所示的上游引物PRR30-F和SEQ ID No.10所示的下游引物PRR30-R组成；

所述探针C为检测内参基因PRR30的探针PRR30-P，其核苷酸序列如SEQ ID No.11所示。

4.根据权利要求1-3中任一所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中还含有对照品；

所述对照品为对照品A、对照品B或对照品C：

所述对照品A由DNA片段A1、DNA片段A2和DNA片段C组成；或者由含有所述DNA片段A1的质粒A1、含有所述DNA片段A2的质粒A2和含有所述DNA 片段C的质粒C组成；

所述DNA片段A1为SMN1基因第7外显子，其核苷酸序列为SEQ ID No.12；所述DNA片段A2为SMN2基因第7外显子，其核苷酸序列为SEQ ID No.13；所述DNA片段C为所述内参基因片段；

所述对照品B由DNA片段B1、DNA片段B2和所述DNA片段C组成；或者由含有所述DNA片段B1的质粒B1、含有所述DNA片段B2的质粒B2和所述质粒C组成；

所述DNA片段B1为SMN1基因第8外显子，其核苷酸序列为SEQ ID No.14；所述DNA片段B2为SMN2基因第8外显子，其核苷酸序列为SEQ ID No.15；

所述对照品C由所述DNA片段A1、所述DNA片段A2、所述DNA片段B1、所述DNA片段B2和所述DNA片段C组成；或者由所述质粒A1、所述质粒A2、所述质粒B1、所述质粒B2和所述质粒C组成。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于：所述DNA片段C为内参基因RPP30的片段，其核苷酸序列为SEQ ID No.16。