[发明专利]一种玉米叶黄化基因oy2以及与其连锁的InDel分子标记和应用在审
| 申请号： | 202011220380.1 | 申请日： | 2020-11-05 |
| 公开（公告）号： | CN112210560A | 公开（公告）日： | 2021-01-12 |
| 发明（设计）人： | 袁广胜;沈亚欧;潘光堂;何慧;杨焱;王智颖;史家豪;陈本芳;马浪浪;邹超英 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12N15/11;C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 北京正华智诚专利代理事务所(普通合伙) 11870 | 代理人： | 何凡 |
| 地址： | 611130 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 玉米 黄化 基因 oy2 以及 与其 连锁 indel 分子 标记 应用 | ||
1.一种玉米叶黄化基因oy2，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的玉米叶黄化基因oy2，其特征在于，所述基因在编码区第十三个外显子上发生一个单碱基突变，突变位点为G/A。
3.根据权利要求1所述的玉米叶黄化基因oy2，其特征在于，所述基因编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
4.一种与基因oy2连锁的InDel分子标记，其特征在于，所述InDel分子标记定位于玉米5号染色体上，其核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。
5.一种用于扩增权利要求3所述的InDel分子标记的引物对，其特征在于，所述引物对的具体序列如下：
InDel-F：GAATTGGTTTGCGCCACAGT；
InDel-R：TGTTTATTCTTCAAGGCTGTCAGA。
6.一种筛选黄化叶玉米的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)提取待测玉米DNA；
(2)采用权利要求4所述的引物对待测基因进行PCR扩增；
(3)对扩增产物进行测序，如若扩增产物在突变位点的核苷酸碱基为A/A，则其为黄化叶玉米。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述PCR程序为：94℃预变性2min；98℃变性10s；60℃退火30s；68℃延伸5s；共35个循环；68℃再延伸10min。
8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述PCR反应体系为：Taq Mix7.5μL，上下游引物分别为0.75μL，DNA模板1μL，用双蒸水定容至15μL。
9.一种筛选黄化叶玉米的试剂盒，其特征在于，包括权利要求4所述分子标记，和/或权利要求5所述的引物对。
10.一种玉米全基因组芯片，其特征在于，包括权利要求4所述的分子标记。
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