[发明专利]一种仿生人造颞下颌关节盘的制备方法

说明书

本发明提供了一种仿生人造颞下颌关节盘的制备方法，制备方法包括以下步骤：收取猪的颞下颌关节盘，清洗，粗化孔隙处理，得样品一；将样品一在混合溶液中放置，然后离心，再冷冻干燥，并收集颞下颌关节盘，得样品二；用十二烷基硫酸钠溶液和DNA酶对样品二浸泡搅拌，得脱细胞的颞下颌关节盘；将糖胺聚糖和蛋白分别与聚己内酯、聚乙烯醇、甲基丙烯酰明胶和P共混，然后与脱细胞的颞下颌关节盘进行灌注，得仿生人造颞下颌关节盘。本发明利用脱细胞的方法去除原动物关节盘的免疫原性，有效解决了现有技术中无法匹配颞下颌关节的生理负荷、稳定性较差和重建困难等问题。

技术领域

本发明属于生物医用材料技术领域，具体涉及一种仿生人造颞下颌关节盘的制备方法。

背景技术

颞下颌关节盘(Temporomandibular joint disk,TMJ disk)是位于下颌髁突和颞骨关节窝之间的纤维软骨样组织，是颞下颌关节行使功能的主要组成部分和重要基础，主要作用在于润滑关节面、分散载荷、缓冲震荡、减少髁突与关节窝骨性结构之间的不协调。临床上颞下颌关节盘的破坏或缺失是引起颞下颌关节疾病的主要病因之一，也会进而造成整个口颌系统功能异常，严重影响患者的生活质量。据相关资料显示，全世界每年需要重建关节盘的患者多达百万例，所需医疗费用也高达数亿美元。

颞下颌关节盘是一个内外径大于前后径的椭圆形纤维软骨盘，其解剖结构与组织特性都是为了满足其生物力学功能的实现。目前，有关关节盘的生物力学研究已经表明：颞下颌关节盘在关节的功能运动中需要承受摩擦、压缩、拉伸和剪切等多个分量的力，因此颞下颌关节盘也是人体最好发穿孔、破裂等疾病的纤维软骨器官。由于缺乏血管和细胞，代谢缓慢，颞下颌关节盘一旦发生缺损，自身修复能力极差。

目前，临床上常用的颞下颌关节盘修复替代材料主要包括脱细胞异体组织补片和自身临近组织瓣膜的转移修复，但无论解剖学结构还是组织学成分，尤其是替代插补物的生物力学性能，都与颞下颌关节盘相去甚远，无法匹配颞下颌关节的生理负荷，稳定性较差。同时，颞下颌关节盘形态特殊，成分多样，结构复杂，利用人工材料很难获得效果良好的仿生替代品，这更使颞下颌关节盘重建难上加难。因此，如何寻找或构建一种新的颞下颌关节盘替代材料已经成为颞下颌关节疾病治疗领域中一个亟待解决的重要课题。

发明内容

针对现有技术中存在的上述问题，本发明提供一种仿生人造颞下颌关节盘的制备方法，利用脱细胞的方法去除原动物关节盘的免疫原性，构建一种全新的仿生人造颞下颌关节盘，不但可以最大程度地保留颞下颌关节盘的成分和结构，而且可以实现关节盘形态的稳定性，且制备方法方便快捷，制备成本低，有效解决了现有技术中无法匹配颞下颌关节的生理负荷、稳定性较差和重建困难等问题，便于推广使用。

为实现上述目的，本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：提供一种仿生人造颞下颌关节盘的制备方法，包括以下步骤：

(1)在无菌条件下收取体重35-45kg的小型猪的颞下颌关节盘，清洗，然后用17W美国光波紫外激光器进行粗化孔隙处理，得样品一；

(2)在3-5℃摇床条件下将步骤(1)所得样品一在混合溶液中放置36-60h，然后离心提取糖胺聚糖和蛋白，再将剩余上清液进行冷冻干燥，并将处理后的颞下颌关节盘收集备用，得样品二；

(3)在室温下用4-6wt％十二烷基硫酸钠溶液和4-6KU/mL DNA酶对步骤(2)所得样品二浸泡搅拌2-4h，得脱细胞的颞下颌关节盘；

(4)将步骤(2)所得糖胺聚糖和蛋白分别与5-20wt％的聚己内酯、聚乙烯醇、甲基丙烯酰明胶和P(NASC-co-HepMAm)共混，然后在真空条件下与步骤(3)所得脱细胞的颞下颌关节盘进行灌注，得仿生人造颞下颌关节盘。

进一步，步骤(1)中，用青霉素生理盐水清洗去除血迹。

进一步，步骤(1)中，粗化孔隙处理时，功率达激光器最大为28％，单孔5s。