[发明专利]佐剂组合物及其制备方法

说明书

本发明涉及一种新的能够增强抗原免疫响应的免疫复合物，该免疫复合物包含聚核糖肌苷‑聚核糖胞苷酸(PIC)和聚乙二醇(PEG)。本发明的免疫复合物可显著增强抗原的免疫响应性从而增强机体的特异性抗体增强反应和非特异性免疫反应。在制备过程中，不需要对免疫复合物做进一步处理以降低其分子量，实现了免疫复合物制备工艺简单，降低能耗的优势。

技术领域

本发明涉及生物免疫制剂及其制备方法，更具体地，涉及用于增强免疫响应的生物制剂及其制备方法，用于促进和增强宿主体内的免疫反应。

背景技术

机体的免疫系统具有产生特异性和非特异性免疫力的作用。非特异性免疫力是指通过巨噬细胞或颗粒细胞的吞噬作用以吞噬外来颗粒或抗原，或者通过天然杀伤细胞的作用来清除机体内异常细胞。特异性免疫反应是以B细胞和T细胞的特异性反应为基础，这些系统主要是在被特定抗原所活化后获得他们的反应性，而且在未来暴露于该特定抗原时展现出免疫记忆性。利用该机理发展出的疫苗就是通过免疫特异性和记忆性来保护机体对抗有害病原体的有效机制。

通常，B细胞和T淋巴细胞在他们的细胞表面上有针对特定抗原的特定受体，能够产生特异性免疫力。为了寻找安全有效的疫苗，重组、纯化及合成等技术被用以改善抗原的品质和特异性。同时有效佐剂也成为了提高免疫原性的一个发展方向，有效佐剂正成为现代疫苗的一种必要成份。

聚核苷酸复合物已被研究用作佐剂等多种用途，美国专利3906092公开了含有聚核苷酸或聚核苷酸复合物的疫苗增强佐剂型疫苗抗体反应；但研究表明：聚肌核苷酸-聚胞核苷酸(PIC)在用于猴和人体时并没有效果，PIC进入体内后不稳定。据此，有多种方式来改进PIC的不足。

Houston等人通过PIC与poly-L-赖氨酸氢嗅酸盐构建复合物(聚肌核苷酸聚胞核苷酸poly-L-离胺酸羧基-甲基纤维素复合物)，作为一种有效的佐剂，来增加初级抗体反应而无需其他佐剂的辅助。

中国专利93105862.7，通过卡那霉素、钙离子与聚肌核苷酸-聚胞核苷酸形成复合物，可以作为人和哺乳动物的有效安全的疫苗佐剂。

中国专利CN101166559A，公开了包含聚核苷酸佐剂、一种抗生素以及一个正价离子的佐剂组合物，其中对聚核苷酸佐剂组合物中的分子量做了进一步限定，限定为至少66000道尔顿。该聚核苷酸佐剂和抗原物质相结合可以有效的引起特异体液免疫反应，从而增进保护性免疫力。

中国专利CN103405762A，公开了以聚肌核苷酸-聚胞核苷酸为主的佐剂，该佐剂含有抗生素和阳离子，并进一步限定聚核苷酸佐剂组合物分子量介于66000-1200000道尔顿，且大小介于6.4S至24.0S的分子大小范围。

中国专利CN104857016A，公开了鉴定用于治疗癌症的化合物的方法，通过聚乙烯亚胺聚阳离子与聚肌核苷酸-聚胞核苷酸的复合来进行癌症的治疗，其中聚乙烯亚胺阳离子发挥运载体的作用。

由此可见，在聚肌核苷酸-聚胞核苷酸佐剂的研究方面，集中于对其改进的研究颇多，提高免疫原性，激发机体的免疫反应依然是研究的重点，以满足疫苗产品的需求。

发明内容

本发明基于对聚核苷酸佐剂的常年使用和研究的基础上，一方面提出一种新的能够增强抗原免疫响应的免疫复合物，该免疫复合物包含聚核糖肌苷-聚核糖胞苷酸(PIC)和聚乙二醇(PEG)。聚乙二醇增加了聚核糖肌苷与聚核糖胞苷酸的配对反应，增色效应和免疫效应都呈现显著增加。本发明的免疫复合物可显著增强抗原的免疫响应性从而增强机体的特异性抗体增强反应和非特异性免疫反应。在制备过程中，不需要对免疫复合物的分子量做进一步处理，实现了免疫复合物制备工艺简单，降低能耗的优势。

进一步，本发明的增强抗原免疫响应的免疫复合物优选含有含阳离子稳定剂，所述阳离子稳定剂包括脂质体、赖氨酸、丝氨酸、硫酸氨基葡萄糖、盐酸氨基葡萄糖、壳聚糖、壳聚糖硫酸盐、壳聚糖盐酸盐等，阳离子稳定剂的浓度选择0.01-5％(g/L)，优选0.05-1％(g/L)。