[发明专利]一种复方西羚解毒制剂化学成分全面解析方法

权利要求书

1.一种基于UPLC-Q-TOF-MS分析仪器、目标前体离子的分析策略的中药化学成分的快速分离及鉴定方法，其特征在于，步骤如下：（1）首先对中药成分进行信息整合，总结其结构特点及结构变化规律；对不同结构特点的每一类代表性化合物使用UPLC-Q-TOF-MS分析仪器进行质谱分析，总结质谱裂解规律及中性丢失规律；（2）以代表性化合物为核心，根据每类化合物结构变化规律构建理论前体离子，采用一级质谱验证理论前体离子的正确性，构建目标前体离子列表；（3）采用二级质谱对目标前体离子的裂解方式及中性丢失规律进行分析，验证目标前体离子的正确性，并综合分析质谱、保留时间信息对中药化学成分进行全面、快速解析；

所述中药为复方西羚解毒胶囊或复方西羚解毒片；

包括以下条件：UPLC：色谱柱为Agilent Advance Bio Peptide 2.1×250 mm, 2.7 μm；流动相：水相A为0.1%甲酸水溶液，有机相B为乙腈溶液；采用梯度洗脱方式进行色谱分离，梯度洗脱程序如下：0-13 min，5-13% B；13-14 min，13-19% B；14-24 min，19-24% B；24-31 min，24-67% B；31-40 min，67-95% B。

2.按照权利要求1所述的分离及鉴定方法，其特征在于，供试品及标准品溶液采用甲醇超声提取。

3.按照权利要求1所述的分离及鉴定方法，其特征在于，其质谱电离源为ESI源；MS参数如下：毛细管电压3500 V，雾化器压力35 psi，干燥气体温度300 ℃，流速8.0 L/min。

4.按照权利要求1-3中任一项所述的分离及鉴定方法，其特征在于，从复方西羚解毒胶囊或片剂中分离并鉴定确认145个化合物，包括27个酚酸类化合物，分别是原儿茶酸，新绿原酸，红景天苷，绿原酸，香草酸，对羟基苯甲醛，隐绿原酸，咖啡酸，丁香酸，对羟基苯乙酸，对香豆酸，阿魏酸，异绿原酸B，异绿原酸A，异绿原酸C，丁香酚，没食子酸，对羟基苯甲酸，1-咖啡酰-β-D-葡萄糖，2-甲氧基苯甲酸，4-乙酰基苯甲酸，3,4-二羟基苯基丙酸，3-O-阿魏酰基奎宁酸，5-羟基阿魏酸，4-甲氧基肉桂酸，肉桂酸甲酯，咖啡酸甲酯；46个黄酮类化合物，分别是芦丁，异牡荆苷，甘草苷，金丝桃苷，异槲皮苷，木犀草苷，染料木苷，橙皮苷，芹糖异甘草苷，异甘草苷，大豆苷元，甘草素，黄豆黄素，毛蕊异黄酮，木犀草素，柚皮素，异甘草素，芒柄花素，芫花素，光甘草定，Glucoisoliquiritin apioside，Genistein-7-O-gentibioside，Genistein-7,4'-di-O-β-D-glucopyranoside，忍冬苷，香豌豆酚-7-O-β-D-葡萄糖苷，6′′-O-acetylisoliquiritin apioside，7-羟基-3’-乙酰氧基-4’-甲氧基异黄酮，紫铆花素-4’-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，4’-Hydroxy-7-acetoxyflavone，6''-O-acetylisoliquiritin，Chalcononaringenin-4-O-β-D-glucopyranoside，4′,6,7-三羟基-2′-甲氧基查耳酮，4',7-二羟基黄酮，甘草查耳酮 B，2（s）-3’,5’,7-三羟基二氢黄酮，4′-O-Acetyl-naringenin，驴食草酚，甘草异黄酮B，甘草黄酮醇，甘草查耳酮 A，Glabridinglycosides，甘草异黄酮A，3,4-didehydroglabridin，甘草黄酮B，Isoangustone A，4′-甲基光甘草定，39个三萜类化合物，分别是桔梗皂苷L，去芹糖桔梗皂苷D，桔梗皂苷D，甘草酸，甘草次酸，白桦脂酸，齐墩果酸，熊果酸，桔梗皂苷G2，去芹糖桔梗皂苷E，Triterpene N1，β-Gentiotriosyl platycodigenin，桔梗皂苷E，Triterpene N2，去芹糖桔梗皂苷D3，Platycodin D2，桔梗皂苷H，Triterpene N3，Triterpene N4，Deapi-2''-O-acetylplatycodin D2，Triterpene N5，3''-O-Acetyl-polygalacin D2，Platycodin C，桔梗皂苷C，Platycodin V，桔梗酸D，甘草皂苷A3，Triterpene N6，甘草皂苷G2，云甘甙K2，云甘甙G2，甘草皂苷E2，甘草皂苷K2，22-乙酰基甘草醛，3-O-(α-L-阿拉伯吡喃糖基(1-2)-β-D-吡喃葡糖醛酸基)甘草次酸，乌拉尔甘草皂苷C，乌拉尔甘草皂苷W，甘草皂苷J2，3''-O-β-D-吡喃葡萄糖桔梗皂苷元；33个其他类化合物，分别是连翘酯苷A，毛蕊花糖苷，牛蒡子苷元，邻苯二甲酸二丁基酯，乳糖，尿苷，尿嘧啶，连翘酸-1'-O-B-D-葡萄糖苷，马钱素酸，连翘酯苷E，Forsythide，连翘酯苷C，裂环马钱素酸，Forsythenside A，木通苯乙醇苷B，连翘酯苷G，木通苯乙醇苷A，罗汉松树脂酚苷，7,2’,4’-三羟基-5-甲氧基-3-芳香豆素，ForsydoitrisideA，Suspenoidside D，Suspenoidside B，连翘脂素，牛蒡酚E，牛蒡酚H，罗汉松树脂酚，牛蒡酚A，牛蒡酚F，甘草宁I，甘草香豆素，甘草香豆酮，甘草酚，豆甾醇；

其中，化合物Triterpene N1，Triterpene N2，Triterpene N3，Triterpene N4，Triterpene N5，Triterpene N6为6个新化合物，结构式依次为下式所示，

Triterpene N1：；

Triterpene N2：；

Triterpene N3：；

Triterpene N4：；

Triterpene N5：；

Triterpene N6：。

5.根据权利要求4所述的分离及鉴定方法，其特点在于，除绿原酸以外的144个化合物为首次从复方西羚解毒胶囊或复方西羚解毒片中分离得到；化合物香豌豆酚-7-O-β-D-葡萄糖苷，7-羟基-3’-乙酰氧基-4’-甲氧基异黄酮，4’-Hydroxy-7-acetoxyflavone，4′-O-Acetyl-naringenin为首次从甘草中分离得到，化合物Glabridin glycosides为首次从牛蒡子中分离得到。