[发明专利]曲唑酮的检测方法有效
申请号: | 202011222453.0 | 申请日: | 2020-11-05 |
公开(公告)号: | CN112305134B | 公开(公告)日: | 2022-07-12 |
发明(设计)人: | 刘杏立;贾永娟;倪君君 | 申请(专利权)人: | 北京和合医学诊断技术股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/06 | 分类号: | G01N30/06;G01N30/74 |
代理公司: | 济南信达专利事务所有限公司 37100 | 代理人: | 李世喆 |
地址: | 101111 北京市北京经济技术开发区经*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 曲唑酮 检测 方法 | ||
1.曲唑酮的检测方法,其特征在于,包括:
制备至少三种浓度的标准溶液,其中,所述标准溶液为具有曲唑酮和内标物的溶液,所述至少三种浓度的标准溶液中的内标物的量相同;
利用液相色谱仪在预设的检测条件下分别检测每一种所述标准溶液,获得每一种所述标准溶液对应的第一检测结果;
根据各个所述第一检测结果、所述标准溶液中曲唑酮的浓度和内标物的浓度,拟合曲唑酮的标准曲线方程;
对待处理样品进行离心处理,取离心后的第一上清液;
向所述第一上清液内加入内标物,涡旋混匀,顺次加入蛋白沉淀剂,对所述第一上清液进行蛋白沉淀,得到待测样品;
利用液相色谱仪在所述检测条件下检测所述待测样品,获得所述待测样品的第二检测结果;
基于所述标准曲线方程和所述第二检测结果,得到所述待测样品中曲唑酮的浓度;
所述检测条件中的液相条件,包括:洗脱流动相中的水相与有机相的体积比为35:65-50:50;
C18反相色谱柱;
洗脱流动相中的水相包括:含有磷酸二氢钠和磷酸氢二钠的水溶液;
洗脱流动相中的有机相包括:乙腈溶液;
柱温为35-45℃;
流速为0.8-1.2 mL/min;
所述向所述第一上清液内加入内标物,涡旋混匀,顺次加入蛋白沉淀剂,对所述第一上清液进行蛋白沉淀,得到待测样品,包括:
向所述第一上清液内加入内标物,在1500-2000 rpm的转速下涡旋混合0.5-1.5 min;
顺次加入蛋白沉淀剂,在1500-2000 rpm的转速下涡旋混合4-6 min,并在10000-15000rpm的转速下高速离心8-12 min,取离心后的第二上清液作为待测样品。
2.根据权利要求1所述的曲唑酮的检测方法,其特征在于,
所述检测条件中的荧光检测条件,包括:
激发波长:320 nm;发射波长:440 nm。
3.根据权利要求1所述的曲唑酮的检测方法,其特征在于,
所述标准曲线方程的两个变量分别为:所述标准溶液中曲唑酮的色谱峰面积与内标物的色谱峰面积的比值,以及所述标准溶液中曲唑酮的浓度与内标物的浓度的比值。
4.根据权利要求1所述的曲唑酮的检测方法,其特征在于,
所述蛋白沉淀剂包括:乙腈溶液和/或甲醇溶液。
5.根据权利要求4所述的曲唑酮的检测方法,其特征在于,
所述第一上清液与所述蛋白沉淀剂的体积比为1:3-1:12。
6.根据权利要求1所述的曲唑酮的检测方法,其特征在于,
所述对待处理样品进行离心处理,取离心后的第一上清液,包括:
将待处理样品在3000-4000 rpm的转速下离心8-12 min,取离心后的上清液作为第一上清液。
7.根据权利要求1至6中任一所述的曲唑酮的检测方法,其特征在于,
所述内标物为2-萘酚。
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