[发明专利]一种木芙蓉叶黄酮成分鉴定方法

说明书

本发明属于成分含量鉴定技术领域，提供了一种木芙蓉叶黄酮成分鉴定方法。包括如下步骤：a、确定黄酮成分标准品；b、总黄酮提取工艺取得总黄酮提取液；c、紫外‑可见分光光度法测定总黄酮含量；d、分离成分，采用梯度洗脱法为总黄酮提取液进行分离；f、对分离品进行数据分析。实际运用中，通过上述的一种木芙蓉叶黄酮成分鉴定方法，以确定木芙蓉叶的采收期，方便采收，提高黄酮提取量。该方式结果准确，适用于中药农用推广。

技术领域

本发明涉及成分含量鉴定技术领域，具体涉及一种木芙蓉叶黄酮成分鉴定方法。

背景技术

植物木芙蓉的干燥叶，有凉血解毒,消肿止痛的功效，用于治疗痈疽喉肿,缠身蛇丹,烫伤，目赤肿痛，跌打损伤[4]。现代研究表明其具有抑菌[5-6]，抗病毒]，抗肿瘤等作用。2015版《中国药典》载其定量测芦丁含量，作为质量控制标准，同时生产上药农习以测定成分的高低作为确定采收期的标志。但是否芦丁为其特征性活性成分尚无确切的研究说明。因此木芙蓉采收期的选择依据缺乏。通过对黄酮含量的动态变化对木芙蓉叶进行多方面考察，以确定其最佳采收期。

发明内容

针对现有技术中的缺陷，本发明提供一种木芙蓉叶黄酮成分鉴定方法，以确定木芙蓉叶的采收期。包括如下步骤：a、确定黄酮成分标准品； b、总黄酮提取工艺取得总黄酮提取液；c、紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量；d、分离成分，采用梯度洗脱法为总黄酮提取液进行分离；f、对分离品进行数据分析。

进一步的，还包括重复鉴定，分别在采收期4月至10月内，每月重复鉴定。

进一步的，所述步骤a中以芦丁、金丝桃苷、槲皮苷、槲皮素和加山奈酚为参考成分。

进一步的，所述步骤b中超声将，精密称取的芦丁、金丝桃苷、槲皮苷、槲皮素和加山奈酚，溶解于50％乙醇溶液中。

进一步的，所述步骤d中，将Hypersil ODS-C18为固定相；乙腈(A)冰醋酸酸水溶液（B）为流动相。

进一步的，所述步骤f包括单因素方差分析和因子分析，先对分离成分中的芦丁、金丝桃苷、槲皮苷、槲皮素和加山奈酚进行单因素方差分析，再对芦丁、金丝桃苷、槲皮苷、槲皮素和加山奈酚进行因子分析。

由上述技术方案可知，本发明提供的一种木芙蓉叶黄酮成分鉴定方法的有益效果：（1）确定标准品，使得检测范围更大，更容易确定采集期内的黄酮变化，更有利于方便鉴定黄酮变化。（2）通过采取总黄酮的提取工艺取得总黄酮提取液，该方式能够有效的获得总黄酮提取液。（3）通过对分离品进行数据分析，使得在实际运用中，能够有效的获得检测数据。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。在所有附图中，各元件或部分并不一定按照实际的比例绘制。

图1为不同采收期木芙蓉叶总黄酮含量μg/ml；

图2为四种对照品标准曲线；

图3为四种黄酮类成分在不同温度下的峰面积RSD；

图4为不同采收期木芙蓉叶样品中黄酮类成分含量的比例％；