[发明专利]可同时富集三种食源性致病菌的复合培养基及制备方法

说明书

本发明公开了一种可同时富集三种食源性致病菌即单增李斯特菌、大肠杆菌O157:H7和沙门氏菌的复合增菌培养基及制备方法，该培养基的配方包括：胰蛋白胨15.0‑19.0份、蛋白胨2.7‑3.3份、酵母浸膏5.5‑6.5份、氯化钠4.5‑5.5份、磷酸氢二钾2.25‑2.75份、磷酸氢二钠8.6‑10.6份、磷酸二氢钾1.22‑1.48份、蛋白胨24.0‑30.0份、牛肉粉14.0‑18.0份、大豆蛋白胨10.0‑14.0份、葡萄糖2.0‑5.0份、放线菌酮0.10‑0.30份、甘露醇2.5‑3.5份、丙酮酸钠4.5‑6.5份、吖啶黄0.00125‑0.00300份、磷霉素钠0.0007813‑0.0032500份、蒸馏水1000份，pH值为6.8‑7.4。本发明中的复合增菌培养基的单增菌效果优于其各自的选择性增菌液，且能够较好地抑制非目标菌的生长。在有非目标菌存在的情况下，该培养基也能实现三种目标菌的等速、快速增殖。

技术领域

本发明属于致病菌的前增菌培养基技术领域，具体涉及一种可同时富集三种食源性致病菌即单增李斯特菌、大肠杆菌O157:H7和沙门氏菌的复合培养基及制备方法。

背景技术

近年来因进食被单增李斯特菌、大肠杆菌O157:H7和沙门氏菌等食源性致病菌污染的食品而引起的食源性疾病常有发生。食源性致病菌的控制与检测已经受到世界各地的高度重视。

单增李斯特菌、大肠杆菌O157:H7和沙门氏菌是我国食品安全国家标准中规定的必须要检测的三种常见的食源性致病菌。通常情况下，食品中可能存在的食源性致病菌的数量往往比较少，为保证检测结果的准确性，无论是经典的传统培养检测方法还是当前各种快速检测的新技术，都需要进行前增菌过程。由于不同种类致病菌其营养要求不尽相同，故而目前应用较多的快速增菌培养基通常都只能培养某一特定种类的食源性致病菌。如此，前增菌后的该样品只能用于单一食源性致病菌的检测，这就极大地限制了诸如多重PCR、多通道SPR生物传感器、多通道BLI生物传感器等高通量检测技术在食源性致病菌检测中的应用。为解决这一问题，国内外对于共增菌培养有了一些研究，但目前能够用于单增李斯特菌、大肠杆菌O157:H7和沙门氏菌的共增菌培养基很少，且共增菌效果不是很理想。因此，开发一种新的能够使这三种致病菌等速快速增殖的通用增菌培养基对于提升这些致病菌的检测效率是大有益处的。

发明内容

为了克服现有技术中存在的培养不同的致病菌往往要用不同的增菌培养基，增加了检测的工作量等问题，本发明提供了一种可同时培养单增李斯特菌、大肠杆菌O157:H7和沙门氏菌的复合增菌培养基及制备方法，适用于多重PCR、多通道BLI生物传感器等高通量检测技术，有助于实现三种致病菌的同时快速检测。

本发明通过如下技术方案实现：

一种用于单增李斯特菌、大肠杆菌O157:H7和沙门氏菌复合增菌的培养基，以质量份数计，其配方组成为：胰蛋白胨15.0-19.0份、蛋白胨2.7-3.3份、酵母浸膏5.5-6.5份、氯化钠4.5-5.5份、磷酸氢二钾2.25-2.75份、磷酸氢二钠8.6-10.6份、磷酸二氢钾1.22-1.48份、蛋白胨24.0-30.0份、牛肉粉14.0-18.0份、大豆蛋白胨10.0-14.0份、葡萄糖2.0-5.0份、放线菌酮0.10-0.30份、甘露醇2.5-3.5份、丙酮酸钠4.5-6.5份、吖啶黄0.00125-0.00300份、磷霉素钠0.0007813-0.0032500份、蒸馏水1000份，pH值为6.8-7.4。

优选的，所述配方组成为，以质量份数计：胰蛋白胨17.0份、蛋白胨3.0份、酵母浸膏6.0份、氯化钠5.0份、磷酸氢二钾2.5份、磷酸氢二钠9.6份、磷酸二氢钾1.35份、蛋白胨25.0份、牛肉粉15.0份、大豆蛋白胨14.0份、葡萄糖3.0份、放线菌酮0.3份、甘露醇3.0份、丙酮酸钠6.0份、吖啶黄0.003份、磷霉素钠0.003125份、蒸馏水1000份，pH值为7.2。

本发明的又一个目的是提供单增李斯特菌、大肠杆菌O157:H7和沙门氏菌复合增菌培养基的制备方法，具体包括以下步骤：