[发明专利]分泌人淀粉样蛋白-β单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用

说明书

本发明属于免疫检测领域，公开了二种分泌抗人源淀粉样蛋白‑β1‑42位氨基酸单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，用于分泌抗hAβsubgt;1‑42/subgt;单克隆抗体的杂交瘤细胞株，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号分别为CCTCC NO C2020131、CCTCC NO C2020132。本发明通过提供2株分泌抗新型hAβsubgt;1‑42/subgt;单克隆抗体的杂交瘤细胞株，能够制备获得特异性识别人源淀粉样蛋白‑β单体、人源淀粉样蛋白‑β突变体单体、低分子量人源淀粉样蛋白‑β、低分子量人源淀粉样蛋白‑β突变体、人源淀粉样蛋白‑β原纤维、人源淀粉样蛋白‑β突变体原纤维的单克隆抗体，有效解决市场现有的hAβsubgt;1‑42/subgt;单克隆抗体质量水平参差不齐、严重限制试剂盒质量等问题。

技术领域

本发明属于免疫检测领域，更具体地，涉及两种分泌抗人源淀粉样蛋白-β1-42位氨基酸(human amyloid beta peptide 1-42,hAβ_1-42)单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，尤其涉及两株能够分泌抗hAβ_1-42单克隆抗体的杂交瘤细胞株。

背景技术

随着社会的老龄化，引起痴呆的阿兹海默症发病率逐年升高。目前，我国痴呆症的患病数量显著高出世界平均水平。阿兹海默病(Alzheimer's disease,AD)，又译为阿尔茨海默病，俗称的老年痴呆症，是发生在老年期及老年前期的一种原发性退行性脑病，指的是一种持续性高级神经功能活动障碍，即在没有意识障碍的状态下，记忆、思维、分析判断、视空间辨认、情绪等方面的障碍。其特征性病理变化为大脑皮层萎缩，并伴有β-淀粉样蛋白沉积，神经原纤维缠结，大量记忆性神经元数目减少，以及老年斑的形成。目前尚无特效治疗或逆转疾病进展的治疗药物。

目前中国有老年痴呆患者500万人之多，占世界总病例数的四分之一，而且每年平均有30万新发病例。目前中国老年痴呆的患病率已随着年龄的升高呈显著增长趋势：75岁以上达8.26％，80岁以上高达11.4％；老年痴呆的患者女性多于男性，60岁以上妇女患老年痴呆，通常是相匹配男性的2到3倍。

阿兹海默症仍然缺乏有效的早期诊断方法和治疗手段，给患者家庭和社会都带来极大的经济负担。因此，早期诊断阿尔茨海默病(AD)是极其需要的。此外，临床需要大量的生物标志物来识别MCI患者的早期AD。而脑脊液生物标志物淀粉样蛋白的42个氨基酸残基，证明有足够高诊断准确性，以满足这一挑战。人源淀粉样蛋白-β1-42位氨基酸(即，human Aβ_1-42,hAβ_1-42，由42个特定的氨基酸组成)是一种特定的蛋白，然而，目前针对Aβ_1–42的检测方法相对匮乏。

免疫学检测由于其灵敏度高，速度快的优势，得到越来越广泛的应用。人源淀粉样蛋白-β免疫学检测试剂盒质量的最主要制约因素就是生物活性原材料的质量。从方法学上来说，hAβ_1-42检测试剂盒大多采用双抗体夹心法，其生物活性原材料就是hAβ_1-42单克隆抗体。而市场现有的hAβ_1-42单克隆抗体质量水平参差不齐，绝大部分与Aβ_1-40或者其他形式的Aβ发生交叉反应，严重限制了试剂盒的质量。鉴于此，有必要开发出高质量的hAβ_1-42单克隆抗体，以满足试剂盒的质量要求。

发明内容